16S rRNA基因为靶基因的TaqMan probe实时荧光定量PCR检测体系的建立方法

摘要：

本发明是应用新兴分子生物学技术之一的Real-time?PCR对动物源性嗜衣原体(Chlamydophilapsittaci、C.abortus、C.caviae、C.pecorum、C.felis)实施的快速检测与诊断方法。本检测体系采用以动物源性嗜衣原体的16S?rRNA的保守区域为基础设计了一对引物及相应的TaqMan探针。该体系能对来自动物的粪便和泄殖腔的棉拭子及人的气管洗脱液中存在的动物源性嗜衣原体基因进行检测，并且检测敏感度比普通的PCR高出10倍。Real-time?PCR具有无需进行后PCR的处理，可避免因进行琼脂糖凝胶电泳而可能造成的交叉污染，从而提高检测的准确率和可信度。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200910094279.3

申请日期：2009-03-31

公开/公告号：CN101812505A

公开/公告日：2010-08-25

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:昆明理工大学

发明/设计人:柳陈坚;龚福明;吴少雄;张忠华

主申请人地址:650093 云南省昆明市五华区学府路253号(昆明理工大学)

专利代理机构:昆明今威专利代理有限公司 53115

代理人:赛晓刚

国别省市代码:云南;53

权利要求：

一种建立TaqMan?probe实时荧光定量PCR检测体系的方法，以动物源性嗜衣原体的16S?rRNA为靶基因，包括标准菌株的培养和DNA的分离纯化、TaqMan?probe检测体系的确立，TaqMan?probe检测体系的检测步骤。