一种内切β-1,3葡聚糖酶基因及其克隆方法

摘要：

一种内切β-1，3葡聚糖酶基因及其克隆方法，属于微生物基因工程领域。本发明提供了来源于粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)AS 3.1604的一种内切β-1，3葡聚糖酶基因glu，提供了基因glu的核苷酸序列和相应蛋白质的氨基酸序列，提供了含有基因glu的大肠杆菌表达载体pET28a-glu以及在大肠杆菌中的高效表达。本发明可用于内切β-1，3葡聚糖酶工业化生产的基因工程菌的构建，提高微生物发酵法生产内切β-1，3葡聚糖酶的水平和质量。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510080820.7

申请日期：2005-06-30

公开/公告号：CN1699576

公开/公告日：2005-11-23

主分类号：C12N15/56

申请/专利权人:江南大学

发明/设计人:王正祥;马骏双

主申请人地址:214036江苏省无锡市惠河路170号

专利代理机构:无锡市大为专利事务所

代理人:时旭丹

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

1、一种来源于粗糙脉孢菌(Neurosporacrassa)AS3.1604中的内切β-1，3葡聚糖酶基因glu，其核苷酸序列为：<underscore>atg</underscore>tctccattgctggacgtctccgcttcagtctccttgaactggaccagcgctcaaggt60gtttccgaccgaccgaccaggttttggtactccagtatcgaccacagcactccccttgtg120cgcggcttcgctcccgaccttgacggagatgtcaactatgccgtcttcaaggcagtgaaa180cccggcgatggggcgagtatccaaacagcgatcaactcggggaccaacggtgctaagaga240cacggtctatggtttgcttcccagccacgagttgtgtacataccgccgggaacatacgag300atctctgagaccatcttcatgaacactgacacagttctgatgggcgacgcaacagatgta360aggacgatggcctctcccatgcaagcggaaccacccatcatcaaagcatcttcgaacttc420tccgggaatcaaacgttgatctctggccaagaccccgcaactggtatttccggtgagcta480tcgttcgccgtctccttgaagaacttaatcctcgacaccaccaatatcccaggagaccaa540gccttcacagctctctggtggggtgttgctcaaggagctcagttgcagaatgtgaagatc600cgtatggcgcctgccatcgatggtgagggacacagtggtattcgcctcggccgtggctcg660actctcggagtttcggatgttcgtatcgaatacgggcaaaacggtatctggtataacggc720catcagcaagcagttttcaagagcatctacttcttcaaaaatgctgtgggaatgttcatt780gacggtggcgccacgatcagcatcgtcaacccgacctttgacggctgtggcttgggcgtc840taccacgtcgcgggcaacccttggattggtctaatcgatgccatctctatcaactccggt900acgacgctgaagacgacagactggccaaactacctggtcgagaaccttcgtgtcatcagc960ggaaaaaccgagaacgcggtcgaagggcccggcgactttgttctggcaaccaagccaaac1020gtagcccagctctcgtacgccaacactgttggccatgatcccatctatggccccattgaa1080gcagcgcagttgaaccgtccatcatcgctggcgcctggacctgatgggcgttatgcatac1140cttccagcaccgaactatgccgagctcagcgtccaagactttctcaacgtcaaagatcct1200cttcagaacggaggctgcctcgtctttggcgacaacacccgagacgagtcctccaccctc1260aacgccatccttcgtctggccgctcgtcagaacaagatcgcttactttcccttcggcaag1320taccgcgtcgactcgactcttttcgttccctccggctcccgtattgtcggcgaagcgtgg1380gccacaatcacgggatatggccccttcttcacagacagcgctcatccccaaccgatcatc1440aaggtcggcaaccccggcgatattggcaccgcgcacatccaggatatgcgcttcaccgta1500tcggacgtgcttcccggagccatcatcctgcagttcaacctcgccggtgcgcagccgggg1560gacgtggcaatctggaactcgcttgtcacagtcggaggaacgcggggtgcgaaggcgtta1620acggacaagtgcgtcaatccggagacggacgaggcgtgcaaggctgctttcttgggtatc1680catctcgcttcgacgtcgtccgtgtatctcgagaacgtatggaactgggtagccgaccac1740atcgccgaagaaccgatatcgccgggcgggagcaacatcgccggaaagggcggagtgctc1800gtcgaagcgaccaaggggacctggctgcacgcgctgggatcggagcactggtggctgtac1860cagcttaatctgcgaaaggcgtcgaatgtgttagtgacgatgttgcaaagcgagaccaac1920tatgaccagggagacaacgcggtgcaggtggtgccgcatccgtggacgccggacgtggag1980ggatggggcgatccggactttggctggtgcgcggggcaggcgaacgagaagaggtgtcga2040atggggttcgcgaactacatcaatggcggaagcaacattcggacctacgccagtgcctcg2100tgggcgttcttcagcgggccgggataccaagggtgcgcggggcagtatcagtgccaacgg2160tatatgcattgggtggaggagacaccggccaatttgcaggcgtttgggttgtgctcgaag2220gatacgtgggcgacgttgaggttggagaatggaaccgagattgtcacgaacgaggggttc2280accgggtcgtggtctgggtcgggaggcgatgtcggcaggtacactccggaggcatcg<underscore>tga</underscore>2340其中，<underscore>atg</underscore>为起始密码子，<underscore>tga</underscore>为终止密码子。