快速构建目标基因高表达的哺乳动物细胞株的体系和方法

摘要：

本发明涉及应用突变与重组技术筛选可扩增性的高转录活性位点，并在位点处插入标记的方法。本发明还涉及应用位点特异性重组机制快速构建并获得目标基因高表达的哺乳动物细胞系的方法，即应用重组酶识别和切割一对重组信号序列(整合标记载体与靶向表达载体各具有一个)，完成位点特异性重组，实现目标基因的稳定高表达。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510064335.0

申请日期：2005-04-14

公开/公告号：CN1693467

公开/公告日：2005-11-09

主分类号：C12N15/65

申请/专利权人:北京天广实生物技术有限公司

发明/设计人:黄 英;王 琰;沈倍奋;黎 燕

主申请人地址:100176北京市经济技术开发区宏达北路12号创新大厦B座3区2层

专利代理机构:北京北翔知识产权代理有限公司

代理人:张广育%姜建成

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1.一种整合标记载体，包括以下元件或序列：A.显性选择标记；B.筛选标记；C.一或多个扩增基因；D.在微生物中增殖的遗传元件；E.重组信号序列；其中，筛选标记和显性选择标记以融合蛋白形式表达，启动子和融合蛋白之间插入重组信号序列，起始密码子ATG位于重组信号序列之前，共同受控于一个弱化的启动子；而扩增基因也采用弱化的病毒启动子。