WSSV的FQ-PCR诊断试剂盒及检测方法
已用于WSSV诊断的FQ-PCRe有耗时较长,存在非特异扩增产物或引物二聚体导致的假阳性结果缺陷。TaqMan PCR有更高的灵敏性和高精确性,但尚未应用于WSSV的诊断。本发明提供的WSSV的FQ-PCR诊断试剂盒和方法,试剂盒中所装的即检测方法中所用反应体系中有2×TaqMan Buffer液、特异性引物-1、特异性引物-2、TaqMan探针等等;PCR仪中的DNA操作过程是先作93℃下预变性2分钟;再作93℃下变性5秒钟、60℃下退火延伸30秒钟、60℃下单点荧光检测的循环40次。本发明提供的WSSV的FQ-PCR诊断试剂盒和方法,配备了所有无法从市场上购得所需的各种试剂;达到了高灵敏度、高重复性、高特异性的指标,另外还有所需待测样本数量要求低和检测所需时间短的特点。
发明专利
CN200510060040.6
2005-03-25
CN1687458
2005-10-26
C12Q1/68
舟山市疾病预防控制中心%杭州博康生物科技有限公司
王忠发;邵俊斌;王建跃;沃健儿;何伟贤;薛 忆
316000浙江省舟山市定海区解放西路231号
舟山固浚专利事务所
范荣新
浙江;33
1、一种WSSV的FQ-PCR诊断试剂盒,有试剂容器,其特征是其中有包装下列试剂的试剂容器:TaqManBuffer液;特异性引物-1;特异性引物-2;特异性TaqMan探针;其中,特异性引物-1的序列为:5’-CCAGAGATGGGAGTAACACGT-3’;特异性引物-2的序列为:5’-CTCCTCTGTTGCGAATACTTCTAAAT-3’;特异性TaqMan探针的序列为:5’-FAM-CGGACCTTGTGCAACTCTCCACCTCC-TAMARA-3’。