一种改装钝顶螺旋藻整藻胆体的方法
一种改装钝顶螺旋藻整藻胆体的方法，属于海洋生物技术领域。本发明以可以大规模培养的蓝藻钝顶螺旋藻为材料，首先应用超声波破碎细胞、去污剂TritonX-100从类囊体膜上解离藻胆体、常规离心去除TritonX-100、叶绿素和细胞碎片得到钝顶螺旋藻藻胆体，然后应用戊二醛交联技术，用RPE改装钝顶螺旋藻藻胆体，最后经聚乙二醇沉淀和Sepharose CL-4B柱层析得到纯的用RPE改装的钝顶螺旋藻藻胆体。改装后的藻胆体，可以大幅度的提高检测的质量和检测灵敏度，在超灵敏的生物医学检测中具有很好的应用前景。
发明专利
CN200510042027.8
2005-01-17
CN1654628
2005-08-17
C12N1/12
山东大学
张玉忠;张熙颖;陈秀兰;周百成
250100山东省济南市历城区山大南路27号
济南金海诺知识产权代理有限公司
于冠军
山东;37
1、一种改装钝顶螺旋藻完整藻胆体的方法，步骤如下：(1)以新鲜的蓝藻-钝顶螺旋藻为原料，溶于磷酸氢二钾-磷酸二氢钾溶液中，采用超声波破碎细胞；(2)在破碎的藻体中加入去污剂，将藻胆体从类囊体膜上解离下来，离心，去除去污剂和破碎的细胞，制备藻胆体的粗提物；(3)采用戊二醛交联技术，用R-藻红蛋白改装钝顶螺旋藻藻胆体，具体如下：取步骤(2)的藻胆体的粗提物用0.9mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液配制成溶液，取钝顶螺旋藻藻胆体溶液0.3mL～0.4mL，迅速与0.07mL～0.09mLR-藻红蛋白溶液混合，R-藻红蛋白溶液用0.1mol/L磷酸缓冲液配制，pH6.8；将混合液边振荡边缓慢滴加用0.75mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液配制的0.1％(W/V)戊二醛溶液0.02mL～0.04mL，19～22℃反应2小时～2.5小时，加1mol/L的甘氨酸溶液0.04mL～0.06mL终止反应30分钟～40分钟，即得改装的钝顶螺旋藻藻胆体。