核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法
一种核酸聚合酶链式反应扩增的低成本优化方法，通过向PCR体系中添加以下任一种优化介质材料：单质钛材料、单质镍材料、单质铋材料、单质锑材料、单质硒材料、单质铬材料来实现对PCR扩增的优化，具体如下：(1)优化介质材料的准备；(2)材料的灭菌；(3)PCR体系优化；(4)PCR产物检测；(5)优化材料从反应结束体系中的分离。本发明具有优化扩增的效果显著，操作更加简便，成本低廉，易于保存，应用广泛，优化材料易于从体系中分离等优点。PCR扩增优化方法对多种PCR体系都具有优化作用，适用于各种PCR扩增，也适用于聚合酶延伸以及基于PCR方法基础的其他生化方法，对基因检测与克隆、遗传分析、临床诊断、基因芯片以及新材料等领域有着潜在而巨大的应用价值。
发明专利
CN200510023780.2
2005-02-03
CN1680573
2005-10-12
C12P19/34
上海交通大学
李海阔;黄洁欢;张晓东;胡钧;樊春海;张治洲
200240上海市闵行区东川路800号
上海交达专利事务所
王锡麟%王桂忠
上海;31
1、一种核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法，其特征在于，通过向PCR体系中添加以下任一种优化介质材料：单质钛材料、单质镍材料、单质铋材料、单质锑材料、单质硒材料、单质铬材料来实现对PCR扩增的优化，具体如下：(1)优化介质材料制备，是指：①以上单质形式表现的各优化介质材料为丝状、片状、粒状、粉状、或胶体状；②丝状材料、片状材料依次在无菌水、无水乙醇中反复清洗，晾干备用；粒状、粉状材料依次在无菌水、无水乙醇中清洗、沉淀，烘干备用；胶体状材料市购即可；(2)以上材料使用前均用紫外线辐照灭菌；(3)PCR体系优化，是指将适量的以上任一种材料加入PCR反应体系当中进行PCR扩增；(4)PCR产物检测，对扩增后的DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，检查扩增条带，与对照体系进行比较；(5)优化材料从反应结束体系中的分离，需要回收扩增得到的PCR产物，则从反应结束体系中分离出优化材料。