一种酵母基因工程菌及耐热耐碱木聚糖酶制剂和应用方法

摘要：

本发明是通过基因工程的手段构建能高效表达耐热耐碱木聚糖酶的酵母基因工程菌，并从其中培养分离纯化制取耐热耐碱木聚糖酶，从而能高效、经济的转化制备木寡糖。利用本发明的酵母基因工程菌GS115/HB705制备的耐热耐碱木聚糖酶酶活性可达426IU/ml，耐热性可达80℃，耐碱性可达pH10.6。利用该耐热耐碱木聚糖酶生产木寡糖纯度高，效益好。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510018574.2

申请日期：2005-04-19

公开/公告号：CN1693448

公开/公告日：2005-11-09

主分类号：C12N1/19

申请/专利权人:湖北大学

发明/设计人:屠 俊;陈亚兰

主申请人地址:430062湖北省武汉市武昌区宝集安

专利代理机构:武汉金堂专利事务所

代理人:丁齐旭

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

1、一种酵母工程菌(毕赤酵母PichiapastorisGS115/HB705)，保藏号为CCTCCNo：M205033，是通过建立环境基因组文库的方法及PCR技术，从中筛选出一耐热耐碱木聚糖酶基因，其特征在于根据筛选到的耐热耐碱木聚糖酶酶基因序列设计引物，应用常规PCR方法用从环境基因组文库中筛选到的阳性克隆的质粒DNA为模板，扩增出1.2Kb的DNA片段，将其插入到毕赤酵母(Pichiapastoris)整合表达载体pHBM905中，再通过化学转化导入到毕赤酵母宿主GS115中，再从中筛选出高效表达耐热耐碱木聚糖酶酵母基因工程菌。