一种单个微生物细胞进行观察的方法
本发明公开了一种单个微生物细胞进行观察的方法，其步骤是：A.制备琼脂糖凝胶；B.微生物细胞悬液的制备；C.微生物细胞悬液和琼脂糖凝胶混合液的制备；D.将混合液倒于载物片上，用移液器吸取混合液点加在载物片的工形槽上至填满工形槽，压上盖玻片，静置、冷却；E.将上述混合液及载物片一齐固定于显微镜上，并用透明胶固定；F.观察及更换细胞溶液。本发明方法简便，操作性强，可在较长时间内，即时地、定点地对细胞进行观察，还可以更换细胞溶液，从而提高了单个微生物细胞试验的操作性。
发明专利
CN200510018150.6
2005-01-13
CN1654625
2005-08-17
C12N1/00
武汉大学
刘茴茴;杨怡然;谢志雄;沈萍
430072湖北省武汉市武昌珞珈山
武汉宇晨专利事务所
王敏锋
湖北;42
1、一种单个微生物细胞进行观察的方法，它包括下列步骤：A、制备琼脂糖凝胶：先称取0.02～0.2克的琼脂糖粉，然后溶解于10毫升的双蒸水中，经过115℃30分钟或121℃20分钟灭菌，琼脂糖凝胶冷却至38～42℃，保温待用；B、微生物细胞悬液的制备：首先接种单菌落至培养基中，活化微生物细胞至稳定期，然后转接细胞至培养基中继续培养，当细胞生长至对数期或稳定期时取出含有细胞的培养液待用；C、微生物细胞悬液和琼脂糖凝胶混合液的制备：琼脂糖凝胶和微生物细胞悬液分别按照步骤A和B进行，琼脂糖凝胶和微生物细胞悬液按体积比进行混合，体积比范围为10比1到1比10，吸取细胞悬液放置于三角烧瓶中，然后向其中加入等体积的琼脂糖凝胶，震摇，得到一种混合液；D、将混合液倒于载物片上：将玻璃条粘附在另一块载玻片上，在工形凹槽中央刻出蚀刻线，然后将步骤C制备得到的混合液用移液器吸取2～3毫升点加在载物片的工形槽上，然后压上盖玻片，混合液将填满工形槽，之后静置于超净工作台内，冷却至25～30℃；E、将上述混合液和载物片固定于显微镜上，进行操作和观察：在上述混合液冷却至25～30℃后，将载物片移至显微镜的载物台上，并用透明胶固定；F、观察及更换细胞溶液：使用显微镜、照相机和电脑组成的系统对固定微生物细胞进行单个的观察和拍照，在载物片工形槽的一边用滤纸吸取原溶液，在另一边补充替换溶液。