一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法及应用

摘要：

一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法及应用，属肿瘤多药耐药逆转剂筛选的技术领域。本发明的技术方案是构建转运蛋白高表达为特征的耐药细胞株，通过检测转运蛋白类底物荧光强度及其变化，确定待筛选的MDR逆转剂对MDR的逆转作用，实现对MDR逆转剂的筛选。用上述方法工作的原理，可制成快速筛选MDR逆转剂的试剂盒。本发明具有直观、快速、准确、高效、经济的优点。适合应用于高通量快速筛选MDR逆转剂。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410099290.6

申请日期：2004-12-29

公开/公告号：CN1661040

公开/公告日：2005-08-31

主分类号：C12Q1/00

申请/专利权人:华东师范大学

发明/设计人:陈菲;王弢;周捷

主申请人地址:200062上海市中山北路3663号

专利代理机构:上海德昭专利事务所

代理人:程宗德%石昭

国别省市代码:上海;31

权利要求：

1.一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法，其特征在于，转运蛋白指P-gp、MRP、BCRP和LRP，包括以下步骤：第一步构建转运蛋白高表达的耐药细胞株①构建含人肿瘤耐药相关的转运蛋白基因的真核表达质粒；②转染人肿瘤细胞，如实体瘤或血癌，获得稳定高表达该转运蛋白的细胞株；③确定获得的转染细胞株具有高表达该转运蛋白，并具有相应的MDR特性；第二步选择合适的荧光化合物作为转运蛋白的荧光底物第三步进行MDR逆转剂的筛选用待筛选化合物及荧光底物作用转染的耐药细胞，用荧光显微镜自带荧光度检测软件分析或荧光Elisa读值，如果待筛选化合物使细胞内的荧光增强说明该化合物具有逆转MDR作用。