棒状链霉菌lat基因缺失的质粒、衍生物及其构建方法

摘要：

棒状链霉菌lat基因缺失的质粒、衍生物及其构建方法，属于生物工程，涉及棒状链霉菌编码赖氨酸ε-转氨酶lat基因的PCR体外扩增引物及lat基因缺失的质粒、衍生物及其构建方法。本发明设计了上下游引物，实现lat基因的体外大量扩增，构建了具有单交换整合能力的质粒和衍生物，对影响克拉维酸产量的棒状链霉菌的lat基因进行缺失突变，并完成在大肠杆菌中的构建工作。该质粒大小约为7.8kb或7.0kb，它包含来自棒状链霉菌中的编码赖氨酸ε-转氨酶基因的一部分及大肠杆菌源质粒和链霉菌源质粒的复制起始点、带有在大肠杆菌和链霉菌中都可表达的阿泊拉霉素抗性选择标记，并具有pSW344E温敏型复制子基因。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410093957.1

申请日期：2004-12-17

公开/公告号：CN1644700

公开/公告日：2005-07-27

主分类号：C12N15/74

申请/专利权人:天津科技大学

发明/设计人:王艳萍;左志晗;金守光

主申请人地址:300222天津市河西区大沽南路1038号

专利代理机构:天津市学苑有限责任专利代理事务所

代理人:李明

国别省市代码:天津;12

权利要求：

1.棒状链霉菌(Streptomycesclavuligerus)lat基因缺失的质粒、衍生物，其特征在于该质粒或其衍生物包含棒状链霉菌中的编码赖氨酸ε-转氨酶基因的一部分，质粒上包含大肠杆菌源质粒和链霉菌源质粒的复制起始点，为带有在大肠杆菌和链霉菌中都可表达的阿泊拉霉素抗性选择标记的穿梭质粒，并具有pSW344E温敏型复制子基因。