一种复杂组织器官前体的制备方法
一种复杂组织器官前体的制备方法，属于生物组织工程技术领域。本发明利用种子细胞或基因与基质材料制备成微胶珠或多管道三维结构，并利用计算机辅助快速成型法、涂覆法、一次性灌注成形等技术实现细胞和支架材料在空间的准确定位，克服了组织工程目前存在的在三维支架中诱导培养细胞需要时间长、细胞在支架中分布不均匀、细胞很难渗入到深层结构中等缺点。利用零部件组合的原理可以达到复杂器官中不同部位不同细胞类型及结构类型的要求，实现复杂组织器官的重建，从而达到修复再生的目的。
发明专利
CN200410091552.4
2004-11-19
CN1609200
2005-04-27
C12N5/08
清华大学
颜永年;王小红;熊卓;林峰;吴任东;张人佶;卢清萍
100084北京市100084-82信箱
北京;11
1.一种复杂组织器官前体的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：1)种子细胞或基因与基质材料微胶珠的制备a.分离或诱导所需的种子细胞或基因，将所得的不同种类的种子细胞或基因的悬浮液离心分离后分别与含有1～40％的基质材料的溶液均匀混合，制成细胞或基因与基质材料的混合物；所述的基质材料为明胶、胶原、明胶/胶原、明胶/壳聚糖或明胶/海藻酸钠，其中所述的明胶/壳聚糖或明胶/海藻酸钠的混合溶液中明胶与壳聚糖或明胶与海藻酸钠的质量比0.5～100∶1，所述种子细胞或基因占所述基质材料混合溶液的0.01～10％；所述的基质材料的溶液为水溶液或pH＝6～8的0.09M的氯化钠或0.09M的氯化钠和3-羟甲基氨基甲烷盐酸溶液；b.用静电微囊发生器或微滴注入技术将细胞或基因与明胶/壳聚糖基质材料喷入1～20％三磷酸钠水溶液交联；对于明胶/海藻酸钠基质材料喷或注入浓度为1～20％乳酸钙或氯化钙水溶液交联，形成微球；然后将三磷酸钠水溶液或乳酸钙、氯化钙水溶液吸出；将微球与浓度为0.1～1％的戊二醛溶液进一步反应1～180秒钟，形成微胶珠；对于细胞或基因与明胶、胶原或明胶/胶原混合物直接喷或注入浓度为0.1～1％的戊二醛溶液反应1～180秒钟，形成微胶珠；对于细胞或基因与明胶/壳聚糖、明胶/海藻酸钠基质材料形成的微胶珠再与浓度为0.1～10％柠檬酸钠缓冲溶液反应10分钟～2小时，形成液化微胶珠；