一种制备细胞芯片的方法及其装置
本发明属于生物医学领域，本发明公开了一种细胞芯片新的制备方法，具体涉及一种细胞芯片的制备方法及其实现该方法的装置，本发明通过阵列管与内芯之间形成的空腔结构，将细胞样本通过琼脂糖包埋于空腔内，细胞琼脂糖包埋块在外套与底层固定板之间形成的带微孔结构的扩大的空腔内进行脱水、透明、浸蜡等处理，而后利用阵列管装置在形成石蜡空心小孔的同时，轻推柱芯使细胞琼脂包埋块落入阵列小孔内，制成了细胞芯片石蜡包埋块，再经过切片、染色即可完成细胞芯片的制备。使用本装置及方法能够迅速大量的一次成型制备出几十、上百种不同细胞类型的细胞芯片。本装置构造简单，使用方便，非常适合于在医学诊断、药物开发、细胞生物学等领域推广使用。
发明专利
CN200410073348.X
2004-12-06
CN1661039
2005-08-31
C12Q1/00
李文生%陈倩
李文生;陈倩
710061陕西省西安市雁塔区青松路陕西省人民医院朱雀苑小区4号楼1单元5号
陕西;61
1.一种制备细胞芯片的方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：1)收集多份(2份以上)培养细胞或脱落细胞、穿刺液等于离心管内，2000-5000转/分离心5分钟，弃上清，加入适量10％福尔马林或95％酒精固定30-60分钟，离心弃上清，用少许PBS溶解沉淀；2)1-3％优质琼脂糖微波加热溶解后置于55-60℃水浴锅中保持熔化状态；3)根据欲制备芯片中所含细胞数量及琼脂糖包埋块的大小选择相应标号的制备器并调节内芯的位置，预留制备器顶端适当大小的空心管腔；4)用微量加样器将少许熔化的琼脂糖加至相对应的制备器顶端空心管腔内，稍等，加入少量溶解细胞，然后再加入少量熔化的琼脂糖封闭管口，按对应位置一一加样，直至完成最后一例细胞样本的琼脂糖包埋；5)琼脂糖冷却凝固后，将外层套管向上推2-10mm，使带有微孔的一段外套管暴露，同时固定阵列管固定板，向上推内芯固定板，使成形的细胞琼脂糖包埋小柱落入带有微孔的外套管腔内，然后在外套管上面放置带有微孔的底层固定板，两侧用橡皮筋将底层固定板与外套管固定板固定牢靠；6)将制备器倒置，底层固定板位于最下层；7)按石蜡切片制备流程常规脱水、透明、浸蜡；8)将制备器正置，取下底层挡板，用少许溶解状态琼脂糖或石蜡一一封固外套层管口；9)在包埋框下置一包埋用平板，将制备器平放其上，在平板上倾倒少许熔化专用石蜡，待其冷却凝固后，缓慢向上拔出制备器，同时轻轻压下内芯，使外套层管腔内的细胞琼脂包埋小柱按相同的方向在同一平面整齐的落入已经形成的小孔中；10)小心缓慢加入熔化的石蜡，待其冷却凝固后即可将所在细胞包埋小柱按规则的阵列方式固定于同一蜡块，将其从包埋框中取出即可得到细胞芯片的蜡块；11)冷却凝固蜡块后即可进行切片，染色，并可进行免疫细胞化学、原位杂交等检测。