利用角朊细胞干细胞和牙髓干细胞进行牙齿再生的技术
本发明属于器官再生技术，具体说，本发明涉及利用角朊细胞干细胞和牙髓干细胞进行牙齿再生的技术。本发明的技术方案：从臼牙中取出牙髓组织，经消化酶消化后，转入培养液中培养；培养24h后，用PBS洗涤三次，去除末贴壁细胞，贴壁生长的细胞继续培养至14-16天时，进行传代培养；牙髓干细胞经生长因子BMP4和FGF10诱导24h后将体外培养的角朊细胞干细胞和牙髓干细胞进行重组，形成重组团块；将重组团块置于37℃5％CO<sub>2</sub>培养箱中培养24h，再移植到口腔内，经培养10-12周后，在口腔内形成牙齿。本发明的优点在于利用角朊细胞干细胞和牙髓干细胞进行牙齿再生，角朊细胞干细胞和牙髓干细胞可根据公开的技术手段通过体外大量培养得到，大大扩大了材料的来源，方便推广使用。
发明专利
CN200410071721.8
2004-07-15
CN1587393
2005-03-02
C12N5/08
福建师范大学
张彦定;陈一平;黄义德
350007福建省福州市福州仓山上山路8号
福建;35
1.一种牙齿再生技术，其特征在于该技术包括如下步骤：I、牙髓干细胞的分离和体外培养从臼牙中取出牙髓组织，经消化液消化40-60min、转入培养液培养24h后，用PBS洗涤三次，取贴壁生长的细胞继续培养至14-16天；II、牙髓干细胞成牙能力的诱导取体外培养的牙髓干细胞1.0-5.0×105个，4000rpm离心5min，形成细胞团块，将细胞团块置于组织培养皿内，向培养皿中添加诱导培养液，并置于37℃5％CO2培养箱中培养24h；III、角朊细胞干细胞与牙髓干细胞重组体外培养的角朊细胞干细胞经中性蛋白酶消化后，切成小块，取一小块覆盖在步骤2中的牙髓干细胞上，形成重组团块；IV、重组团块的体外培养和移植将重组团块置于组织培养皿中，向组织培养皿内加入重组团块三分之一高度的含10-20％胎牛血清的DMEM培养液，并置于37℃5％CO2培养箱中培养24h，再移植到同种生物口腔内，经培养10-12周后，移植的重聚团块在口腔内形成牙齿。