制备DNA接头的方法

摘要：

制备DNA接头的方法，选择有一个多克隆位点的长度100bp-100K常用质粒，以此质粒为模板设计引物，通过突变PCR方法构建突变质粒，在ScaII和多克隆位点之间的片段引入新的酶切位点分别构建两种突变质粒或在质粒中引入新的多克隆位点和单酶切位点SacII，得到突变质粒pGAT4，导入细菌扩增，最后酶切分离得到目的接头。本发明采用独特的生物合成技术生产两种DNA接头(adaptor)，即adaptor-ligation PCR所使用的接头和AFLP中所使用的系列接头的方法。这种由生物合成的天然DNA接头，具有合成方便，生产成本低，连接效率高，适用范围广，可选择的酶切位点多等特点。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410065679.9

申请日期：2004-11-12

公开/公告号：CN1618962

公开/公告日：2005-05-25

主分类号：C12N15/09

申请/专利权人:南京大学

发明/设计人:田大成;孙小芹;杜建厂

主申请人地址:210093江苏省南京市汉口路22号

专利代理机构:南京苏高专利事务所

代理人:成立珍

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

1、制备DNA接头的方法，其特征是选择有一个多克隆位点的长度100bp-100K常用质粒，以此质粒为模板设计引物，通过突变PCR方法构建突变质粒，导入细菌扩增，最后酶切分离得到目的接头。