5'-核苷酸酶活性测定方法及5'-核苷酸酶诊断试剂盒
本发明涉及一种测定5′-核苷酸酶活性的方法,同时本发明还涉及5′-核苷酸酶诊断试剂盒,属于医学检验测定技术领域。该试剂盒包括缓冲液、肌苷单磷酸、腺苷三磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸、还原型辅酶、肌苷激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶、稳定剂,通过将样品与试剂按一定的体积比混合,使之发生酶偶联反应,再将最终反应物置于生化分析仪下,检测主波长吸光度变化的情况(速度),从而测算出5′-核苷酸酶的活性大小。采用本发明完全可以通过生化分析仪器得出所需的测定结果,并且灵敏度高、精确度好,不受内外源物质的污染,便于推广应用。
发明专利
CN200410065565.4
2004-11-23
CN1778964
2006-05-31
C12Q1/48(2006.01)I
苏州艾杰生物科技有限公司
王尔中
215021江苏省苏州市工业园区机场路328号国际科技园122B
南京苏科专利代理有限责任公司
何朝旭
江苏;32
1.一种5′-核苷酸酶活性测定方法,步骤如下:1)、将样品与主要由腺苷三磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸、还原型辅酶、肌苷激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶组成的试剂混合,使之发生如下原理的反应:肌苷单磷酸+水<underscore>5′-核苷酸酶</underscore>肌苷+单磷酸腺苷三磷酸+肌苷<underscore>肌苷激酶</underscore>腺苷二磷酸+肌苷单磷酸腺苷二磷酸+磷酸烯醇式丙酮酸<underscore>丙酮酸激酶</underscore>腺苷三磷酸+丙酮酸丙酮酸+还原型辅酶<underscore>乳酸脱氢酶</underscore>乳酸+氧化型辅酶2)、检测最终反应物在主波长340nm吸光度下降的速度,测算出5′-核苷酸酶的活性大小。