5'-核苷酸酶活性测定方法及5'-核苷酸酶诊断试剂盒
本发明涉及一种测定5′-核苷酸酶活性的方法,同时本发明还涉及5′-核苷酸酶诊断试剂盒,属于医学检验测定技术领域。该试剂盒包括缓冲液、尿苷单磷酸、丙酮酸、乙醇、氧化型辅酶、丙酮酸氧化酶、过氧化氢酶、醛脱氢酶、稳定剂,通过将样品与试剂按一定的体积比混合,使之发生酶偶联反应,再将最终反应物置于生化分析仪下,检测主波长吸光度变化的情况(速度),从而测算出5′-核苷酸酶的活性大小。采用本发明完全可以通过生化分析仪器得出所需的测定结果,并且灵敏度高、精确度好,不受内外源物质的污染,便于推广应用。
发明专利
CN200410064912.1
2004-10-11
CN1760372
2006-04-19
C12Q1/32(2006.01)I
王尔中
王尔中
215021江苏省苏州市工业园区机场路328号国际科技园122B
南京苏科专利代理有限责任公司
何朝旭
江苏;32
1.一种5′-核苷酸酶活性测定方法,步骤如下:1)、将样品与主要由尿苷单磷酸、丙酮酸、乙醇、氧化型辅酶、丙酮酸氧化酶、过氧化氢酶、醛脱氢酶组成的试剂混合,使之发生如下方法原理的反应:尿苷单磷酸+水<underscore>5′-核苷酸酶</underscore>尿苷+磷酸根磷酸根+丙酮酸+氧+水<underscore>丙酮酸氧化酶</underscore>乙酰磷酸+二氧化碳+过氧化氢过氧化氢+乙醇<underscore>过氧化氢酶</underscore>乙醛+水乙醛+氧化型辅酶+水<underscore>醛脱氢酶</underscore>乙酸+还原性辅酶+氢离子2)、检测最终反应物在主波长340nm吸光度下降的速度,测算出5′-核苷酸酶的活性大小。