5＇-核苷酸酶活性测定方法及5＇-核苷酸酶诊断试剂盒

摘要：

本发明涉及一种测定5′-核苷酸酶活性的方法，同时本发明还涉及5′-核苷酸酶诊断试剂盒，属于医学检验测定技术领域。该试剂盒包括缓冲液、肌苷单磷酸、丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸、还原型辅酶、丙酮酸氧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、苹果酸脱氢酶、稳定剂，通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生酶偶联反应，再将最终反应物置于生化分析仪下，检测主波长吸光度变化的情况(速度)，从而测算出5′-核苷酸酶的活性大小。采用本发明完全可以通过生化分析仪器得出所需的测定结果，并且灵敏度高、精确度好，不受内外源物质的污染，便于推广应用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410064909.X

申请日期：2004-10-11

公开/公告号：CN1760371

公开/公告日：2006-04-19

主分类号：C12Q1/32(2006.01)I

申请/专利权人:王尔中

发明/设计人:王尔中

主申请人地址:215021江苏省苏州市工业园区机场路328号国际科技园122B

专利代理机构:南京苏科专利代理有限责任公司

代理人:何朝旭

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

1.一种5′-核苷酸酶活性测定方法，步骤如下：1)、将样品与主要由肌苷单磷酸、丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸、还原型辅酶、丙酮酸氧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、苹果酸脱氢酶组成的试剂混合，使之发生如下反应：肌苷单磷酸+水<underscore>5核苷酸酶</underscore>肌苷+磷酸根磷酸根+丙酮酸+氧+水<underscore>丙酮酸氧化酶</underscore>乙酰磷酸+二氧化碳+过氧化氢二氧化碳+磷酸烯醇式丙酮酸<underscore>磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶</underscore>草酰乙酸+磷酸根草酰乙酸+还原型辅酶<underscore>苹果酸脱氢酶</underscore>苹果酸+氧化型辅酶2)、检测最终反应物在主波长340nm吸光度下降的速度，测算出5′-核苷酸酶的活性大小。