人胰岛素基因在甲醇酵母中的分泌表达

摘要：

本发明涉及一种人胰岛素基因的分泌表达，特别是人胰岛素基因在甲醇酵母(Pichia Pastoris)GS115/pPICM^#101、保藏编号为CCTCCNO.M204071中的分泌表达。它包括B、A链的合成，表达质粒和工程菌构建，宿主细胞的转化，转化子及高表达量工程菌筛选等步骤。本发明省去了转肽去掉C链等极为复杂的过程，减少了生产步骤，缩短了工时，因此它具有工艺简单的优点，采用本发明比其它表达系统高出10-100倍的表达量，因此大大提高了产量。它为人胰岛素工业化生产提供了一条新的简捷的途径。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410061039.0

申请日期：2004-11-03

公开/公告号：CN1614019

公开/公告日：2005-05-11

主分类号：C12N15/17

申请/专利权人:马延高%马向东

发明/设计人:马延高;马向东

主申请人地址:430056湖北省武汉市汉阳区沌口经济开发区绿岛花园38栋76门202号

专利代理机构:武汉开元专利代理有限责任公司

代理人:樊戎

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

1.一种人胰岛素基因在甲醇酵母中的分泌表达，其特征在于：(1)人胰岛素基因A、B链采用酵母偏爱密码子；(2)人胰岛素A、B链分别置于同一甲醇酵母(PichiaPastoris)GS115/pPICM#101、保藏编号为CCTCCNO.M204071中表达质粒pPIC9K的表达盒α-因子信号肽之后，进行诱导表达；(3)其表达产物成熟并分泌于酵母培养基中，利于分离纯化。