一种莲藕组织总RNA的快速提取方法

摘要：

本发明公开了一种莲藕组织总RNA的快速提取方法。其步骤是：首先是对实验药品的配制及实验用品的处理；其次是取材，取莲藕幼嫩的叶及与叶相连的叶柄；第三是抽提，沉淀，离心得到总RNA；第四是总RNA的鉴定，分别用紫外分光光度计和甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测。根据所得数据及电泳结果，表明所得莲藕组织总RNA完整性好、纯度高并且产率高。本发明实验过程简便，操作方便、安全，结果准确、有效，重复性好，该方法也适用于富含多糖、多酚的其它物种的植物组织总RNA的提取。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410060812.1

申请日期：2004-09-09

公开/公告号：CN1587405

公开/公告日：2005-03-02

主分类号：C12N15/10

申请/专利权人:武汉大学

发明/设计人:王曼玲;朱虹玲;周立;胡中立;周明全;宋运淳

主申请人地址:430072湖北省武汉市武昌珞珈山

专利代理机构:武汉宇晨专利事务所

代理人:王敏锋

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

1、一种莲藕组织总RNA的快速提取方法，它包括下列步骤：A、实验药品的配制：配制RNA提取缓冲液、10MLiCl、3MNaAc、氯仿∶异戊醇24∶1，溶液用0.1％DEPC-H2O；B、实验用品的处理：器皿用180-200℃连续烘烤8-12小时或用0.1％DEPC-H2O浸泡过夜后120-130℃灭菌30-60分钟，电泳槽及加样梳用双氧水浸泡过夜；C、取材：莲藕幼嫩的叶及与叶相连的叶柄；D、提取总RNA：首先是磨样：取新鲜材料于研钵中加入缓冲液后研磨；其次是抽提：用氯仿∶异戊醇24∶1抽提2-3次；第三是沉淀：加入10MLiCl，使RNA沉淀；第四是清洗与保存：清洗RNA沉淀后，于-80℃～-70℃保存。