一种分离哺乳动物XY精子的方法

摘要：

一种分离哺乳动物XY精子的方法，依据哺乳动物X精子的DNA含量比Y精子多的原理，利用荧光染料Hoechst33342对精子DNA染色之后通过流式细胞仪将其分离。本发明通过改进精子分离之前的保存方法、精子的稀释液、分离精子的鞘液和接收液，在保证分离XY精子效率的同时，提高了精子分离的准确率和分离后精子的活力，适用于黄牛、水牛、山羊等哺乳动物XY精子的大规模商业化分离生产，并可与人工授精和体外受精等动物繁殖新技术相结合，大大提高畜牧业生产的效率。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410060793.2

申请日期：2004-08-31

公开/公告号：CN1667118

公开/公告日：2005-09-14

主分类号：C12N5/06

申请/专利权人:广西大学

发明/设计人:卢克焕;陆阳清;张明

主申请人地址:530004广西壮族自治区南宁市城北区大学路100号

专利代理机构:广西南宁公平专利事务所有限责任公司

代理人:翁建华

国别省市代码:广西;45

权利要求：

1.一种分离哺乳动物XY精子的方法，根据哺乳动物X精子的DNA含量比Y精子多的原理，通过荧光染色之后使用流式细胞仪进行分离，其特征是：(1)、在采集的公畜原精液中加入抗生素混合溶液，24小时内恒温下保存。(2)、用不含卵黄的精子稀释液将原精液稀释后加入荧光染色剂、并在水浴锅中孵育染色。水浴结束后加入色素。(3)、在恒温下利用流式细胞仪分离所需的X或Y精子。(4)、用预装有含卵黄的精子接收液的试管收集分离后的X精子和Y精子，分离得到的精液经离心浓缩后可用于人工授精或体外受精，或低温平衡后冷冻保存。