利用谷物籽粒大规模生产超氧化物歧化酶复合酶的方法

摘要：

一种利用谷物籽粒大规模生产超氧化物歧化酶复合酶的方法，其特征是：将谷物籽粒进行筛选、消毒、清洗；将籽粒在温水中浸泡使其吸胀，在发芽槽中保温发芽；将发芽谷物研磨成粗浆，加入缓冲液；将粗浆加入纤维素酶并打成细浆，加入氯化钙；固液分层后，滤液压滤，滤液通过离心机离心，收集离心液；离心液过超滤膜，加入糖化酶，再通过中性超滤膜浓缩，使其达到所需要的SOD浓度；本发明的优点是超氧化物歧化酶，过氧化物酶和过氧化氢酶都能提取出来，产品杂蛋白少，酶的活力高，酶活力可控效果好，保质期长；一条基本工艺路线可以产生系列产品，工艺简单，自动化程度高，安全无污染，耗能少，成本低，效益高；五种谷物种子均可用此工艺生产。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410050222.0

申请日期：2004-08-09

公开/公告号：CN1587395

公开/公告日：2005-03-02

主分类号：C12N9/02

申请/专利权人:陈欣

发明/设计人:陈欣;陈红漫;曹淡君;陈祖洁;王成余

主申请人地址:110011辽宁省沈阳市沈河区祥顺小区金觉寺街60-1号6-1-1室

专利代理机构:沈阳科威专利代理有限责任公司

代理人:张述学

国别省市代码:辽宁;21

权利要求：

1、一种利用谷物籽粒大规模生产超氧化物歧化酶复合酶的方法，其特征是有如下步骤：A、将谷物籽粒进行筛选、消毒、清洗，并保证发芽率要达到70％以上；B、将消毒后的籽粒在温水中浸泡一昼夜，使其吸胀，在发芽槽中保温发芽，保温温度为24-30℃，芽长约1-2mm即可；C、将发芽谷物用胶体磨研磨成粗浆，在磨制过程中加入含60-65mMol的磷酸盐缓冲液或磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液，PH7.6-7.8，缓冲液为谷物籽粒重量的1-2倍；D、将粗浆装入贮罐，加入每克酶活为2000单位以上的纤维素酶，其量为谷物重量的0.2-0.5％，搅匀；E、将粗浆用胶体磨打成细浆，细浆装入贮罐，加入谷物重量1-2％的氯化钙，搅匀，在10℃以下静置3-5小时；F、固液分层后，滤液进入饮料压滤机，滤布为200-300目，助滤剂为硅藻土，滤液通过连续管式离心机离心，收集离心液；G、离心液过超滤膜，收集小于14万分子量的流出液，在流出液的贮罐中加入流出液重量0.1-0.3％的糖化酶，搅匀，作用2-3小时，再通过10000分子量的中性超滤膜浓缩，使其达到所需要的SOD浓度；H、在浓缩液中加入0.1-0.2的VE原粉，再加入0.1-0.2％的山梨酸钾或海藻糖，搅匀，将浓缩液置-18--22℃冷冻室使SOD进一步分离、浓缩、净化，将冷冻浓缩液移出，化冻后通过离心机离心；I、将离心液分装、杀菌即成。