一种用于去除转基因植物中选择标记基因的方法

摘要：

本发明描述了一种植物病毒表达载体，可在植物细胞中瞬时、高效表达位点特异性重组酶，以消除转基因植物中的选择标记基因的一种新方法。该方法是将植物病毒表达载体导入转基因植物的细胞，来瞬时表达位点特异性重组酶，去除两个同向重组位点间的选择标记基因，获得无选择标记基因的转基因植物。其中之一例是如下图所示：用烟草花叶病毒表达载体p35S-m30B:cre，通过农杆菌Agrobacterrium tumefaciens CGMCC NO.1176，用侵染法在烟草细胞中瞬时表达Cre重组酶，去除pGNG转基因SR1烟草中两个同向lox位点间的选择标记基因nptII，得到的无选择标记基因的转基因烟草。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410049705.9

申请日期：2004-06-24

公开/公告号：CN1712530

公开/公告日：2005-12-28

主分类号：C12N15/11

申请/专利权人:中国科学院微生物研究所

发明/设计人:方荣祥;贾洪革;陈晓英

主申请人地址:100080北京市中关村北一条13号

专利代理机构:中科专利商标代理有限责任公司

代理人:姜兆元

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1、一种用瞬时表达位点特异性重组酶的植物病毒表达载体去除转基因植物中选择标记基因的方法，该方法步骤包括：构建含有两个同向重组位点的植物转化载体，把选择标记基因克隆在两个重组位点之间；用含此种植物转化载体的农杆菌转化植物获得含选择标记基因的转基因植物；构建一种由植物组成型启动子驱动的表达位点特异性重组酶的植物病毒表达载体；将植物病毒表达载体导入转基因植物的细胞，来瞬时表达位点特异性重组酶，去除两个同向重组位点间的选择标记基因，在不含任何抗生素的培养基上经过组织培养，获得无选择标记基因的转基因植物。