一种构建T载体的方法

摘要：

本发明公开了一种制备T载体的方法，其目的是提供一种制备具有较高TA克隆效率的T载体。本发明的制备T载体的方法，包括以下步骤：1)制备含有XcmI盒或AhdI盒的前T载体；所述XcmI盒包括间隔DNA序列、紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个XcmI酶切位点序列，所述AhdI盒包括所述间隔DNA序列、紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个AhdI酶切位点序列；2)用XcmI或XcmI的同裂酶，或AhdI或AhdI的同裂酶酶切步骤1)中的前T载体，得到T载体；其中，所述步骤1)中的间隔DNA序列为ccdB基因序列。本发明的制备T载体的方法将在基因工程领域中发挥重要作用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410047902.7

申请日期：2004-06-10

公开/公告号：CN1590549

公开/公告日：2005-03-09

主分类号：C12N15/63

申请/专利权人:清华大学

发明/设计人:陈其军;王学臣;周海梦

主申请人地址:100084北京市海淀区清华园

专利代理机构:北京纪凯知识产权代理有限公司

代理人:关畅

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1、一种制备T载体的方法，包括以下步骤：1)制备含有XcmI盒或AhdI盒的前T载体；所述XcmI盒包括间隔DNA序列、紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个XcmI酶切位点序列，所述AhdI盒包括所述间隔DNA序列、紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个AhdI酶切位点序列；2)用XcmI或XcmI的同裂酶，或AhdI或AhdI的同裂酶酶切步骤1)中的前T载体，得到T载体；其特征在于：所述步骤1)中的间隔DNA序列为ccdB基因序列。