一种提取木瓜凝乳蛋白酶的方法

摘要：

本发明公开了一种提取木瓜凝乳蛋白酶的方法，涉及酶制剂领域。本发明所提供的提取木瓜凝乳蛋白酶的方法，包括如下步骤：1)向原料中加入壳聚糖，沉淀后保留清液；2)饱和度为30％的硫酸铵盐析，去除沉淀，保留上清液；3)再用饱和度为50％的硫酸铵盐析，去除沉淀，保留上清液；4)过量酒石酸絮凝上清液，去除沉淀保留上清液；5)饱和度为70％的硫酸铵盐析清液，收集沉淀物；6)用纯水溶解沉淀物，以截留分子量为2万的超滤膜浓缩溶液，收集浓缩液；7)用弱酸性阳离子纤维素-92分离浓缩液，收集洗脱液；8)以截留分子量为1万的超滤膜浓缩洗脱液，得到木瓜凝乳蛋白酶浓缩液。本发明的方法木瓜凝乳蛋白酶酶活和回收率高。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410046107.6

申请日期：2004-05-31

公开/公告号：CN1584025

公开/公告日：2005-02-23

主分类号：C12N9/00

申请/专利权人:广州伟仕科技有限公司

发明/设计人:卢世昌;刘俊凤

主申请人地址:510665广东省广州天河区中山大道建中路3号304室伟仕公司

专利代理机构:北京纪凯知识产权代理有限公司

代理人:关畅

国别省市代码:广东;44

权利要求：

1、一种提取木瓜蛋白凝乳酶的方法，包括如下步骤：1)向番木瓜幼果果浆原料中加入壳聚糖溶液，沉淀后去除沉淀物，保留清液；2)向清液中加入硫酸铵到溶液硫酸铵饱和度为30-40％，去除沉淀，保留上清液；3)向上清液中加入过量酒石酸，絮凝沉淀后，去除沉淀物，保留上清液；4)向上清液中加入硫酸铵到溶液硫酸铵饱和度为65-70％，收集沉淀物；5)用纯水溶解沉淀物，以截留分子量为0.9-1.1万道尔顿的超滤膜浓缩溶液，收集浓缩液；6)用阳离子纤维素CM-C92层析柱分离木瓜凝乳蛋白酶，收集pH5.5的0.7mol/L磷酸钠缓冲液洗脱液；7)以截留分子量为1-2万的超滤膜浓缩木瓜凝乳蛋白酶的洗脱液，得到木瓜凝乳蛋白酶浓缩液。