一种植物金属硫蛋白的制备方法

摘要：

一种植物金属硫蛋白的制备方法其特征包括：利用基因工程技术构建植物金属硫蛋白与硫氧还蛋白融合基因序列，选择开发性质粒pEMT20，并在特选大肠杆菌中来表达植物金属硫蛋白与硫氧还蛋白融合体。将植物金属硫蛋白与硫氧还蛋白融合体工程菌在LB培养液中进行培养。然后离心收集菌体，用缓冲液悬浮菌体，破碎菌体，再离心，上清液与镍琼脂糖在4℃中进行亲和吸附一小时，上柱洗脱、收集馏分、脱盐、酶切后即可得到植物金属硫蛋白。本发明提供一种制备低成本、高产量、高纯度的植物金属硫蛋白的方法。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410044118.0

申请日期：2004-12-13

公开/公告号：CN1644699

公开/公告日：2005-07-27

主分类号：C12N15/62

申请/专利权人:东北林业大学%安志刚%祖元刚

发明/设计人:安志刚;祖元刚

主申请人地址:150040黑龙江省哈尔滨市动力区和兴路26号东北林业大学

国别省市代码:黑龙江;23

权利要求：

1.植物金属硫蛋白融合体工程菌设计，其特征包括：(1)开发性质粒pETM20中六个组氨酸连续基因序列(6xHis)融合于硫氧还蛋白和植物金属硫蛋白基因序列之间；(2)用植物金属硫蛋白(II)基因与硫氧还蛋白基因构建形成融合基因序列，其基因之间的连接处含特定内切酶(TEV)靶基因序列；