一种高效筛选目的蛋白的表达载体，其制备方法及用途

摘要：

本发明公开了一种高效筛选目的蛋白的表达载体，其制备方法及用途。发明人通过在含有CMV启动子和dhfr扩增系统的真核表达载体中引入一个内部核糖体进入位点，将anti-erbB2-scFv-Fc基因与IL-2的融合基因与新霉素抗性基因连接。利用PCR方法对Neo基因进行点突变，构建成表达载体pCMV-HFI-mNeo。本载体特点在于通过引入IRES使融合蛋白基因和Neo基因在同一个启动子启动下共表达；通过对Neo基因的点突变弱化Neo基因表达产物活性，从而提高了阳性表达克隆的筛选效率，大大减少了筛选工作量，获得了目的基因的稳定高效表达克隆。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410039594.3

申请日期：2004-02-19

公开/公告号：CN1657628

公开/公告日：2005-08-24

主分类号：C12N15/64

申请/专利权人:中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所

发明/设计人:陈立勇;解志刚;郭宁;沈倍奋

主申请人地址:100850北京市海淀区太平路27号

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1、一种真核表达载体，其特征在于该载体是含有anti-erbB2-scFv-Fc与IL-2基因的融合基因及新霉素抗性基因突变体的双顺反子表达载体。