一种基因工程重组技术制备人脑利钠肽的方法

摘要：

本发明涉及一种基因工程重组技术制备人脑利钠肽的方法。通过人工合成人脑利钠肽BNP活性部位32个氨基酸编码区相对应的基因与经突变改造的CMP-3-脱氧-D-甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合，中间含肠激酶识别切割位点，该融合基因克隆至甲酵营养型酵母Pichia表达载体获得该融合基因高效表达的工程酵母菌株，该工程菌经发酵后提取层析纯化制备融合蛋白，再经肠激酶切割后分离纯化获得重组人脑利钠肽。该重组肽经体外试验表明具备人脑利钠肽BNP生物活性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410028107.3

申请日期：2004-07-16

公开/公告号：CN1594581

公开/公告日：2005-03-16

主分类号：C12N15/62

申请/专利权人:深圳大学

发明/设计人:刘志刚;吉坤美;喻海琼;高波;张红云

主申请人地址:518060广东省深圳市南山区南油大道2336号

国别省市代码:广东;44

权利要求：

1、一种基因工程重组技术制备人脑利钠肽的方法，包括以下步骤：通过人工合成人脑利钠肽BNP活性部位的32个氨基酸编码区相对应的基因与经突变改造的CMP-3-脱氧-D-甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合，中间含肠激酶识别切割位点，该融合基因克隆至酵母表达载体获得该融合基因高效表达的工程酵母菌株，该工程菌经发酵后提取层析纯化制备融合蛋白，再经肠激酶切割后分离纯化获得重组人脑利钠肽。