一种现场快速定性鉴定赤潮微藻的方法

摘要：

本发明涉及一种快速定性检测赤潮微藻的方法，具体说是全细胞荧光原位杂交技术在防治赤潮方面的应用。具体过程为：1)从已知的赤潮藻目的序列中寻找高度特异的DNA序列作为探针；2)对所选探针标记；3)固定赤潮藻细胞：离心收集藻细胞，加固定液MSE固定，将藻细胞固定在载玻片上干燥；4)将含有探针的杂交液加到载玻片上进行杂交反应；5)冲洗、滴加抗体、干燥后封片，荧光显微镜检测。本发明是将FISH技术改良后应用到赤潮生物检测上，其在定性检测赤潮微藻方面有无可比拟的优越性；简单易行，且准确性也较高；细胞固定后不变形，这对检测自然水体样品打下良好的基础。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410020770.9

申请日期：2004-06-16

公开/公告号：CN1710097

公开/公告日：2005-12-21

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:中国科学院海洋研究所

发明/设计人:王广策;张宝玉

主申请人地址:266071山东省青岛市南海路7号

专利代理机构:沈阳科苑专利商标代理有限公司

代理人:许宗富%周秀梅

国别省市代码:山东;37

权利要求：

1.一种现场快速定性鉴定赤潮微藻的方法，其特征在于：1)探针的确定：从已知的赤潮藻目的序列中寻找高度特异的DNA序列作为探针；采用赤潮藻核糖体大亚基rDNA序列和核糖体大小亚基之间的转录单元间隔区ITS作为目的序列，或以ITS序列设计探针，或在这些目的片段中寻找高度特异的DNA序列作为探针；2)探针的标记：按常规方法对所选探针进行标记；3)固定赤潮藻细胞并裂解：离心收集藻细胞，加固定液MSE固定，将用固定液固定后的赤潮藻细胞固定在载玻片上干燥；4)杂交：将含有探针的杂交液加到有固定细胞的载玻片上，进行杂交反应；5)冲洗、滴加抗体、干燥后封片，荧光显微镜检测。