一种海绵细胞的微载体三维培养方法

摘要：

本发明涉及海洋无脊椎动物细胞的培养，具体地说是一种海绵细胞的微载体三维培养方法；1)在改进人工海水中接种微载体和海绵细胞进行培养；改进人工海水的水溶液中包括：Na⁺，SO₄^2-，HCO₃^-，K⁺，Tris HCl，Cl^-，Mg²⁺，Ca²⁺，SiO₃^2-，Fe³⁺，Zn²⁺，C₆H₅O₇^3-，pH 7.6～8.2，PHA；2)在海绵细胞培养5～8天后，向上述改进人工海水中添加有机碳源、有机氮源和维生素C，形成新的培养液体系；3)在步骤2)之后，每隔2～3天更换培养液，并添加有机碳源和氮源，维生素C，在此条件下海绵细胞能进行正常生长。本发明优点为：可大规模生产药源，可选材料更广泛，应用前景好。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410020708.X

申请日期：2004-06-09

公开/公告号：CN1706937

公开/公告日：2005-12-14

主分类号：C12N5/06

申请/专利权人:中国科学院大连化学物理研究所

发明/设计人:张 卫;赵权宇;虞星炬;金美芳

主申请人地址:116023辽宁省大连市中山路457号

专利代理机构:沈阳科苑专利商标代理有限公司

代理人:许宗富%周秀梅

国别省市代码:辽宁;21

权利要求：

1.一种海绵细胞的微载体三维培养方法，其特征在于：1)在改进人工海水中接种微载体和海绵细胞进行培养；改进人工海水的水溶液中包括：Na+300～500mM，SO42-5.0～10.0mM，HCO3-0.1～0.5mM，K+5.0～15.0mM，TrisHCl10.0～30.0mM，Cl-300～500mM，Mg2+20～60mM，Ca2+5.0～20mM，SiO32-5～150μM，Fe3+30～120μM，Zn2+0.5～4μM，C6H5O73-30～120μM，pH7.6～8.2，PHA的重量浓度为1.5～2.5％；2)在海绵细胞培养5～8天后，向上述改进人工海水中添加有机碳源、有机氮源和维生素C，使它们的浓度分别为5～20μM，形成新的培养液体系；3)在步骤2)之后，每隔2～3天更换培养液体积的50～80％，用改进的人工海水替换并添加有机碳源和氮源使其最终浓度达到20～50μM，添加维生素C使其最终浓度达到10～20μM，在此条件下海绵细胞能进行正常生长。