日本血吸虫中国大陆株SjPP基因及其克隆、表达和应用
本发明涉及日本血吸虫中国大陆株SjPP基因的基因序列及其克隆表达方法和应用。本发明公开的日本血吸虫中国大陆株SjPP基因具有序列1所示的核苷酸序列和相应的序列2的氨基酸序列。本发明应用实验室繁殖的洞庭湖种群东方田鼠阳性血清和酶联葡球菌A蛋白免疫筛选日本血吸虫中国大陆株成虫cDNA文库，经过初筛和3轮复筛获得5个阳性克隆。应用5′RACE技术对其中一克隆的cDNA片段进行5′端延伸扩增，并利用blast进行基因序列的同源性分析，结果表明该基因为一血吸虫新基因。本发明还公开了SjPP在大肠杆菌中的表达方法。本发明SjPP基因可用于制备防治日本血吸虫病重组蛋白疫苗和DNA疫苗。
发明专利
CN200410017743.6
2004-04-16
CN1563382
2005-01-12
C12N15/30
中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所%农业部动物寄生虫学重点开放实验室
林矫矫;姚利晓;傅志强;刘金明;朱传刚;冯新港;苑纯秀;蔡幼民
200232上海市徐汇区石龙路345弄3号
上海新天专利代理有限公司
孙跃虹
上海;31
1、一种日本血吸虫中国大陆株SjPP基因，其特征在于该基因具有如下的核苷酸序列及相应的氨基酸序列：gggaatttgcccttgcaatggacttggatcagtggatacagtctgtcaag50MetAspLeuAspGlnTrpIleGlnSerValLys1510acttgtaagtaccttccagaaaacgatcttagaaaactgtgcaactat98ThrCysLysTyrLeuProGluAsnAspLeuArgLysLeuCysAsnTyr152025gttacggagttgttgattgaagagtgcaatgtgcaaccagtttctttt146ValThrGluLeuLeuIleGluGluCysAsnValGlnProValSerPhe303540cctgtaaccatatgtggtgatattcatggacagttctacgatcttttg194ProValThrIleCysGlyAspIleHisGlyGlnPheTyrAspLeuLeu455055cagttatttcgtcgaggaggaaaactgccggacaaaaattatatattt242GlnLeuPheArgArgGlyGlyLysLeuProAspLysAsnTyrIlePhe60657075atgggggattttgttgatcggggttattacagcctcgaaaccctcaca290MetGlyAspPheValAspArgGlyTyrTyrSerLeuGluThrLeuThr808590tttcttcttgttctcaaagctaagtatccttcacgaataacattattg338PheLeuLeuValLeuLysAlaLysTyrProSerArgIleThrLeuLeu95100105agaggaaaccatgaaagtcggcaagttactcagtgttatggcttctat386ArgGlyAsnHisGluSerArgGlnValThrGlnCysTyrGlyPheTyr110115120gatgaatgtatcaataaatatggtaatgcgaatccatggcattattgt434AspGluCysIleAsnLysTyrGlyAsnAlaAsnProTrpHisTyrCys125130135tgcaaagtgttcgatcttctcacaatagccgcattagttggagaaaaa482CysLysValPheAspLeuLeuThrIleAlaAlaLeuValGlyGluLys140145150155gttctctgcgttcatggaggcctatcacctcaaattaaaacactcgat530ValLeuCysValHisGlyGlyLeuSerProGlnIleLysThrLeuAsp160165170caaatccggacaatcgacagacatatggaaatacccaatgaaggtcca578GlnIleArgThrIleAspArgHisMetGluIleProAsnGluGlyPro175180185ttttgtgacattttatggtcggatcctgatgacgtggctcattgggct626PheCysAspIleLeuTrpSerAspProAspAspValAlaHisTrpAla190195200gttagtccgcgtggagcaggatatttatttgggccaaaagttactaat674ValSerProArgGlyAlaGlyTyrLeuPheGlyProLysValThrAsn205210215gaattcgttgagttaaatggtctagaatgtatttgtagagctcatcaa722GluPheValGluLeuAsnGlyLeuGluCysIleCysArgAlaHisGln220225230235ctcgtgcacgaaggctacaagtgcatgttcgatggacaactaatcact770LeuValHisGluGlyTyrLysCysMetPheAspGlyGlnLeuIleThr240245250atttggtcagctccaaattattgttatcgttgtggaaatgttgcagcg818IleTrpSerAlaProAsnTyrCysTyrArgCysGlyAsnValAlaAla255260265attttggaattccaaagtccaacacaattcgatcctaaactttttgaa866IleLeuGluPheGlnSerProThrGlnPheAspProLysLeuPheGlu270275280gctgtgccagatgaagaacgagtcaaacctcctctaaggattactccg914AlaValProAspGluGluArgValLysProProLeuArgIleThrPro285290295tacttcttgtaacatattcttcttaaacttgatcattttcattctaagt963TyrPheLeu300acaagttttcttgttaactccgattaacactgcgatatccaacagcaataggaacattta1023tttgcattctaaatccagttgtacagatttgagtccaattatttggttctcatacctaaa1083tgtatgtattctttttgcaatttttatttaatcgaaatgtatcaccgacactgcaatgat1143tttgtctttctgacggatccaacagactggtaattgatgaatatacacagcatgcggaca1203attggaagagtaaaattttcgcttaacacaccagacaagttttctcggactagtgtgacg1263ataatacatacatcttatcccaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagggcggcg1319