三维立体培养和诱导骨髓间充质干细胞成软骨细胞的方法

摘要：

本发明公开了一种三维立体培养和诱导骨髓间充质干细胞成软骨细胞的方法，包括如下步骤：1.将骨髓间充质干细胞在预置有培养基和微载体的悬浮培养装置中悬浮培养，在搅拌下扩增骨髓间充质干细胞；2.然后将成软骨细胞诱导培养基加入含收获的Cytodex 3.微载体以及在其上生长的骨髓间充质干细胞的培养装置中，对骨髓间充质干细胞进行聚团成软骨细胞诱导。本发明的方法可在短时间内一次获得大量的软骨细胞，降低了污染几率，减少了细胞损伤，有利于细胞间营养物质的传递。诱导完成后可直接将该复合物移植入体内进行软骨缺损修复实验或为科学研究提供充足的种子细胞来源。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410017588.8

申请日期：2004-04-09

公开/公告号：CN1563364

公开/公告日：2005-01-12

主分类号：C12N5/08

申请/专利权人:华东理工大学

发明/设计人:周燕;谭文松;蒋丹丹;胡静波

主申请人地址:200237上海市梅陇路130号

专利代理机构:中原信达知识产权代理有限责任公司

代理人:罗大忱

国别省市代码:上海;31

权利要求：

1.一种三维立体培养和诱导骨髓间充质干细胞成软骨细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将骨髓间充质干细胞在预置有培养基和微载体的悬浮培养装置中悬浮培养，在搅拌下扩增骨髓间充质干细胞；所说的培养基为含有2％～20％体积百分比胎牛血清的α-MEM；所说的微载体为Cytodex3微载体；(2)然后将成软骨细胞诱导培养基加入含收获的Cytodex3微载体以及在其上生长的骨髓间充质干细胞的培养装置中，对骨髓间充质干细胞进行聚团成软骨细胞诱导；成软骨细胞诱导培养基以DMEM为基础，添加浓度为1～10μg/ml的胰岛素、1～20ng/ml的转化生长因子β3、10～150nmol/L的地塞米松、10～100mg/ml的抗坏血酸磷酸酯、10～100mg/ml的脯氨酸、0.5～5mmol/L的丙酮酸钠。