一种获得目的mRNA的方法

摘要：

本发明提供了一种获得目的mRNA的方法。该方法是将目的基因进行改造，在其3’末端引入oligo(dT)序列，然后分别在5’端和3’端加上限制性内切酶识别序列，并与载体结合，转化到大肠杆菌感受态细胞中，促使其高表达，提取大肠杆菌的总RNA，然后用oligo(dT)纤维素进行分离纯化，获得所需的目的mRNA。本发明提供的方法，可以方便地获得高纯度的所需的mRNA片段，用于相关基因PCR检测试剂盒的开发。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410017218.4

申请日期：2004-03-25

公开/公告号：CN1563377

公开/公告日：2005-01-12

主分类号：C12N15/10

申请/专利权人:华东理工大学

发明/设计人:杨忠;赵建龙;马昱澍;肖君华;王锦之;魏东芝

主申请人地址:200237上海市梅陇路130号

专利代理机构:中原信达知识产权代理有限责任公司

代理人:罗大忱

国别省市代码:上海;31

权利要求：

1.一种获得目的mRNA的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：①在目的基因的3’末端引入oligo(dT)序列，构建表达载体；②表达载体转化到大肠杆菌中；③转化后的大肠杆菌总RNA提取；④mRNA从总RNA中的分离纯化；其中oligo(dT)的数目为20-40。