一种单管嵌套式等位专一聚合酶链式反应方法

摘要：

本发明提供一种用超短引物或含若干错配碱基引物检测碱基突变的单管嵌套式聚合酶链式反应方法，即利用长度为6-14碱基的超短引物或含若干错配碱基通常长度引物进行等位专一扩增，使“野生型等位专一引物”完全失去与突变型模板结合的能力，使“突变型等位专一引物”完全失去与野生型模板结合的能力，从而克服检测的假阳性，改善检测的可靠性。适用于分子生物学实验室对单碱基突变的核酸检测和医学临床检测，特别是遗传性疾病、变异病毒感染、耐药性细菌感染和单碱基突变引起的代谢病的核酸分析。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410016281.6

申请日期：2004-02-13

公开/公告号：CN1654671

公开/公告日：2005-08-17

主分类号：C12P19/34

申请/专利权人:徐定邦%徐文慧

发明/设计人:徐定邦;朱德芬;谢文凯;徐文慧

主申请人地址:200071上海市永兴路58弄2号603室

国别省市代码:上海;31

权利要求：

1.一种单管嵌套式等位专一聚合酶链式反应方法，其步骤依次包括：(1)用外套引物扩增10-30循环；(2)用内套引物扩增10-30循环；其特征在于外套引物是与模板严谨配对的引物，内套引物之一是长度为6-14碱基的超短引物或含1-30个错配碱基的错配引物。