ALB<sub>SIN</sub>/IL-18<sub>MAT</sub>杂交细胞因子
ALB<sub>SIN</sub>是人血清白蛋白的信号肽，IL-18<sub>MAT</sub>为人IL-18的成熟肽。本发明采用基因重建方法，获得ALB<sub>SIN</sub>与IL-18<sub>MAT</sub>的嵌合分子。从人基因组DNA扩增ALB<sub>SIN</sub>序列；由人IL-18原核表达质粒获得IL-18<sub>MAT</sub>序列。以非对称PCR技术得到ALB<sub>SIN</sub>编码区的反义链和IL-18<sub>MAT</sub>正链。采用重叠延伸PGR(SOE-PCR)产生具有ALB<sub>SIN</sub>与IL-18<sub>MAT</sub>的杂交编码序列。定向插入pcDNA3，构建杂交IL-18的真核表达质粒。测序显示重组质粒的表达框由两个设计的靶序列构成，且无移码。该表达质粒转染293、Vero和7721细胞，表达具有生物活性的人IL-18。
发明专利
CN200310115982.0
2003-12-26
CN1635120
2005-07-06
C12N15/62
吉林大学第一医院
谭岩;刘力华;方艳秋;段秀梅;许淑芬;姜艳芳;宋艳;刘玲丽;时阳
130021吉林省长春市新民大街1号
吉林长春新纪元专利代理有限责任公司
白冬冬
吉林;22
1、一种ALBSIN/IL-18MAT杂交细胞因子，其重组的核苷酸/氨基酸片段序列是：cccgcaagcttatgaagtgggtaacctttatttcccttctttttctctttMKWVTFISLLFLFagctcggcttattcctactttggcaagcttgaatctaaattatcagtcSSAYSYFGKLESKLSVataagaaatttgaatgaccaagttctcttcattgaccaaggaaatcggIRNLNDQVLFIDQGNRcctctatttgaagatatgactgattctgactgtagagataatgcaPLFEDMTDSDCRDNAccccggaccatatttattataagtatgtataaagatagccagcctagaPRTIFIISMYKDSQPRggtatggctgtaactatctctgtgaagtgtgagaaaatttcaactctcGMAVTISVKCEKISTLtcctgtgagaacaaaattatttcctttaaggaaatgaatcctcctgatSCENKIISFKEMNPPDaacatcaaggatacaaaaagtgacatcatattctttcagagaagtgtcNIKDTKSDIIFFQRSVccaggacatgataataagatgcaatttgaatcttcatcatacgaaggaPGHDNKMQFESSSYEGtactttctagcttgtgaaaaagagagagacctttttaaactcattttgYFLACEKERDLFKLILaaaaaagaggatgaattgggggatagatctataatgttcactgttcaaKKEDELGDRSIMFTVQaacgaagactgagggccctatNEDstop