构建串联重复顺式作用元件的方法及其专用引物与应用
本发明公开了一种构建串联重复顺式作用元件的方法及其专用引物与应用,其目的是提供一种用于扩增多拷贝、方向相同的顺式作用元件的串联重复序列的引物对,以及提供一种应用该引物对构建串联重复顺式作用元件的方法,将该方法构建的多拷贝、方向相同的顺式作用元件的串联重复序列连接到Pmin基本启动子的上游形成酵母单杂交系统的报告子。该构建报告子的方法快速、准确,不仅能控制串联顺式作用元件的个数,而且可以使顺式作用元件按同一个方向串联,减少了筛选报告子所需要的时间和费用,简化了构建酵母单杂交系统报告子的方法。
发明专利
CN200310115573.0
2003-12-02
CN1624148
2005-06-08
C12P19/34
中国农业科学院作物育种栽培研究所
陈明;高世庆;马有志;程宪国;彭向雷
100081北京市海淀区中关村南大街12号作物所
北京纪凯知识产权代理有限公司
关畅
北京;11
1、一种用于扩增多拷贝方向相同的顺式作用元件的串联重复序列的的引物对:上游引物包括5’端的一个限制性内切酶a的酶切位点序列及连接于所述限制性内切酶a酶切位点序列的3’端的能扩增目的顺式作用元件全序列的引物序列;下游引物包括5’端的至少两个串连的限制性内切酶c和b的酶切位点序列及连接于所述限制性内切酶b的酶切位点序列的3’端的能扩增目的顺式作用元件全序列的引物序列,所述限制性内切酶b的酶切位点序列位于所述能扩增目的顺式作用元件全序列的引物序列和所述限制性内切酶c的酶切位点序列之间,所述限制性内切酶a和所述限制性内切酶b互为同尾酶。