一种剔除转基因植物中标记基因的方法

摘要：

本发明属于植物基因工程，具体涉及从转基因植物中剔除标记基因的方法。利用λ噬菌体attP特异重组位点以及其重组酶基因INT，构建植物转化载体pMFC和pMFB。pMFC含有INT，pMFB含有目的基因和选择标记基因，其选择标记基因位于两个attP位点之间。通过根癌农杆菌介导等植物遗传转化方法分别获得pMFC和pMFB这两种载体的转化植株，两种转化植株进行杂交，杂种植株中INT重组酶表达可特异切除两attP位点间的标记基因，进而在杂交后代分离群体中筛选出剔除标记基因的转基因植株，该植株可通过PCR或Southern杂交等分子鉴定技术进一步确认。标记基因的剔除可提高转基因农产品的生物安全性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200310111414.3

申请日期：2003-11-19

公开/公告号：CN1618960

公开/公告日：2005-05-25

主分类号：C12N15/09

申请/专利权人:华中农业大学

发明/设计人:叶志彪;卢永恩;张俊红;李汉霞;欧阳波

主申请人地址:430070湖北省武汉市洪山区狮子山街

专利代理机构:武汉宇晨专利事务所

代理人:王敏锋

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

1、一种剔除转基因植物中标记基因的方法，其特征在于利用λ噬菌体attP特异重组位点及其重组酶基因(INT)，构建植物转化载体pMFC和pMFB；所说的pMFC含有INT，所说的pMFB含有目的基因和选择标记基因，该选择标记基因位于两个识别序列(attP)位点之间；通过根癌农杆菌介导或其他转基因的方法分别获得pMFC和pMFB两种载体的转化植株；将所说的转化植株进行杂交，然后从杂交后代分离群体中筛选出剔除标记基因的转基因植株，该植株通过PCR或Southern杂交分子鉴定进一步确认。