不同性状海带配子体的鉴定方法及可采用的部分DNA序列

摘要：

本发明涉及对经济海藻海带的配子体进行鉴定的方法，即不同性状海带配子体的鉴定方法及可采用的部分或全部DNA序列；步骤为：1)总DNA提取；2)以上步骤提取的DNA为模板，对总DNA进行PCR扩增反应；3)PCR产物纯化；4)纯化后的DNA进行序列测定，确立rDNAITS区，包括ITS1、5.8S和ITS2区的全序列；5)用对位排列软件进行对位排列，并辅以人工校对，用系统进化分析软件分析各样品DNA序列与数据库中各个序列间的差异。本发明首先建立了一套海带配子体高质量DNA的制备方法和利用DNA序列鉴定经济海藻海带配子体的方法；并对中国经济海藻海带配子体的rDNA ITS区序列进行了测序。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200310105037.2

申请日期：2003-11-07

公开/公告号：CN1614032

公开/公告日：2005-05-11

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:中国科学院海洋研究所

发明/设计人:段德麟;胡自民;赫英俊

主申请人地址:266071山东省青岛市南海路7号

专利代理机构:沈阳科苑专利商标代理有限公司

代理人:许宗富%周秀梅

国别省市代码:山东;37

权利要求：

1.一种不同性状海带配子体鉴定方法，其特征在于，步骤如下：(1)总DNA提取：取新鲜健康的藻体材料，用无菌水处理后，在液氮种研磨成粉末，提取总DNA；(2)PCR扩增：采用正向引物P1：5’AGAAGTCGTAACAAGGTTTCCGTAGG3’，反向引物P4：5’AATCCTGGTTAGTTTCTTTTCCTC3’，利用该引物对总DNA进行PCR扩增反应；(3)PCR产物纯化；(4)DNA序列测定：纯化后的DNA进行序列测定，确立rDNAITS区，包括ITS1、5.8S和ITS2区的全序列；(5)DNA序列数据分析：待分析的rDNAITS区的序列一经测定，用对位排列软件进行对位排列，并辅以人工校对，用系统进化分析软件分析各样品DNA序列与数据库中各个序列间的差异。