增加宿主细胞重组多肽产量的方法
本发明提供了包含编码重组多肽的核酸序列的宿主细胞,其中天然存在的包含序列HXXEH的金属蛋白酶的产生通过遗传操作得到降低或抑制。本发明还涉及通过破坏金属蛋白酶的合成或活性而提高细胞产生多肽的方法。本发明尤其涉及提高自宿主细胞例如但不限于酵母和细菌细胞分泌重组多肽的方法。金属蛋白酶为蛋白酶pitrilysin亚家族的成员,其特征在于包含序列HXXEH,其中X为任一氨基酸。
发明专利
CN03825284.8
2003-09-19
CN1701119
2005-11-23
C12N15/57
CYM1P有限公司
L·荣松;J·F·雷费尔德;A·H·约翰森
丹麦哥本哈根
北京市中咨律师事务所
黄革生%林柏楠
丹麦;DK
1.用于在宿主细胞中产生目的蛋白质的方法,其中所述宿主细胞已经遗传修饰,从而与相应的未经修饰细胞相比,在相同条件下培养时表达显著降低水平的包含HXXEH基元(SEQIDNO1)的金属蛋白酶,所述方法包括:a)向宿主细胞中导入编码目的蛋白质的核酸序列;b)在适当的生长培养基中培养步骤(a)的宿主细胞,以产生目的蛋白质;以及c)分离目的蛋白质。