具有RNAi效应的茎环RNA分子的表达系统

摘要：

本发明发现通过利用tRNA启动子从编码茎环RNA分子的DNA中制备所述RNA分子，所述RNA分子可以被有效地转移到细胞质中，从而显示RNAi效应。所述RNAi效应也可通过将细胞质易位信号序列导入编码茎环RNA分子的DNA中而被有效地赋予。此外，所述RNAi效应可以通过使用polII型启动子将转录产物转移到细胞质中来有效地赋予。在这种情况下，细胞毒活性可通过共表达Dicer基因而被降低。此外，有效的dsRNA可以通过使用Dicer蛋白处理dsRNA或茎环RNA分子来构建。使用这些茎环RNA分子表达系统使得有可能方便地构建缺乏目的基因的剔除细胞。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN03815095.6

申请日期：2003-04-25

公开/公告号：CN1665930

公开/公告日：2005-09-07

主分类号：C12N15/11

申请/专利权人:独立行政法人产业技术总合研究所

发明/设计人:多比良和诚;川崎广明

主申请人地址:日本东京都

专利代理机构:北京市柳沈律师事务所

代理人:巫肖南%封新琴

国别省市代码:日本;JP

权利要求：

1.编码在细胞内具有RNAi效应的茎环RNA分子的DNA，其中所述DNA包含(i)细胞质易位信号序列，和(ii)一种结构，其中(a)编码靶基因mRNA任一区的有义RNA的有义编码DNA，和(b)所述有义编码DNA的互补序列通过间隔区以相反的方向连接，并且所述DNA与启动子可操作地连接。