新的多磷酸AMP磷酸转移酶

摘要：

本发明涉及到下述的新的多磷酸AMP磷酸转移酶(Polyphosphate：AMP Phosphotransferase：PAP)、编码该酶的基因以及他们的利用。(A)作用：催化下述两个反应。NMP(dNMP)+PolyP_(n)→NDP(dNDP)+PolyP_(n-1)(式中，NMP为核苷一磷酸、NDP为核苷二磷酸、dNMP为脱氧核苷一磷酸、dNDP为脱氧核苷二磷酸，n表示多磷酸的聚合度、为100以下的整数)。(B)底物特异性：对AMP、GMP、IMP、dAMP、dGMP特异，也可作用于CMP、UMP、dCMP、TMP。(C)分子量：约55～56Kd(千道尔顿)。(D)比活：每1mg酶蛋白70单位以上。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN03812360.6

申请日期：2003-05-28

公开/公告号：CN1656219

公开/公告日：2005-08-17

主分类号：C12N15/09

申请/专利权人:雅玛山酱油株式会社

发明/设计人:柴肇一;野口利忠

主申请人地址:日本千叶县

专利代理机构:中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

代理人:陈昕

国别省市代码:日本;JP

权利要求：

1.一种具有下述理化性质的多磷酸AMP磷酸转移酶，(A)作用：催化下述两个反应，NMP+PolyP(n)→NDP+PolyP(n-1)dNMP+PolyP(n)→dNDP+PolyP(n-1)式中，NMP为核苷一磷酸、NDP为核苷二磷酸、dNMP为脱氧核苷一磷酸、dNDP为脱氧核苷二磷酸，n表示多磷酸的聚合度、为100以下的整数，(B)底物特异性：对AMP、GMP、IMP、dAMP、dGMP特异，也可作用于CMP、UMP、dCMP、TMP，(C)分子量：约55～56Kd(千道尔顿)，(D)比活：每1mg酶蛋白70单位以上，而所谓1个单位表示于37℃下在1分钟生成1μmole的ADP的活性，在以下条件下测定，<测定条件>向含有20mM氯化镁、10mMAMP以及多磷酸(以无机磷酸计量30mM)的50mMTris-HCl缓冲液(pH7.8)中添加酶标准品后，通过于37℃下保温进行反应，于100℃、热处理1分钟使反应停止，使用高效液相色谱法(HPLC)对反应液中的ADP进行定量。