一种Smad4染色质伸展活性检测方法

摘要：

本发明公开了一种Smad4染色质伸展活性检测方法。该方法包括含有Smad4基因的重组质粒构建，重组质粒转染细胞，基因共扩增产生基因组异染色质区，培养细胞进行表达，免疫荧光染色观察染色质结构改变等步骤。本发明的检测方法可用于检测天然状态下发生的任何Smad4突变后所导致的Smad4染色质结构调节功能变化，有利于判断Smad4基因突变后所造成的后果。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN03156432.1

申请日期：2003-08-29

公开/公告号：CN1590561

公开/公告日：2005-03-09

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所

发明/设计人:叶棋浓;杨晓;严景华;黄翠芬

主申请人地址:100071北京市丰台区东大街20号

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1.一种Smad4染色质伸展活性检测方法，包括以下步骤：(1)将Smad4基因融合于pRC-lac载体的lac阻遏物的下游，构建重组质粒；(2)将(1)构建的质粒转染AO3_1细胞株，用甲氨蝶呤进行基因共扩增，产生基因组异染色质区；(3)培养上述包含Smad4基因的细胞株进行表达，lac操纵基因与表达产物结合，将其靶向到上述异染色质区；(4)免疫荧光染色，观察大规模染色质结构的改变。