0157：H₇出血性大肠杆菌变异株的制取方法

摘要：

本发明是一种0157：H₇出血性大肠杆菌变异株的制取方法，可有效地解决为防治出血性大肠杆菌感染所致严重并发症的疫苗问题，另为临床诊断和治疗提供了病原和动物模型；其实现的技术方案是用标准的出血性大肠杆菌增菌于LB肉汤中，生成含菌液，该菌液口服接种于动物模型，动物腹泻过程中，取其粪便再加入LB肉汤中，增殖培养，然后将细菌接种于分离平板上，培养后挑选菌落，接种克氏双糖和MIU生化管，或用生化仪测定细菌生化特征，再作血清凝集诊断；本发明不但提供了一种出血性大肠杆菌变异株的制备方法，而且确定获得了出血性大肠杆菌的变异株，同时也确定了能模拟人感染出血性大肠杆菌后而导致严重疾病的动物模型，它将有利疫苗的制备和临床治疗问题，是医学上的一大发明，其推广应用，必造福于人类。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN03126246.5

申请日期：2003-07-09

公开/公告号：CN1566325

公开/公告日：2005-01-19

主分类号：C12N1/20

申请/专利权人:李迅

发明/设计人:李迅

主申请人地址:450003河南省郑州市纬五路东段47号

专利代理机构:郑州天阳专利事务所

代理人:聂孟民

国别省市代码:河南;41

权利要求：

1、一种0157:H7出血性大肠杆菌变异株的制取方法，其特征在于是将0157:H7出血性大肠杆菌增菌于由蛋白粉10克、氯化钠10克和酵母粉5克加水1000ml制成的LB肉汤中，在37℃培养4-6小时，增殖细菌浓度为107cfu/ml，然后用该浓度的肉汤含菌液口服接种于动物模型，动物接种48小时后发生腹泻，取动物腹泻中的粪便加入LB肉汤中，在37℃下增殖6-18小时，粪便加入量为每5ml的LB肉汤中加0.1-2克，增殖后的含菌液划线接种于细菌分离平板，在37℃培养18-24小时，挑选菌落，接种克氏双糖和MIU生化培养管内，然后作血清凝集试验，或用PCR测定菌株的毒力基因。