抗体的多顺反子表达

摘要：

此处描述的是一个新型的表达系统，用以从一个单一多顺反子构建体中产生目的多基因产物。尤其是，该表达系统包含一个多顺反子载体，能够在真核宿主细胞中表达功能抗体，其中载体在5′-3′方向上至少包含下面的可操作连接的元件：在真核细胞可操作的启动子；编码至少抗体轻链可变区的DNA序列；内部核糖体进入位点(IRES)；以及至少一个编码抗体重链的DNA序列。也公开了包含多顺反子表达载体的哺乳动物细胞，和一种在用多顺反子表达载体转染的哺乳动物细胞中产生功能抗体的方法。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN02826215.8

申请日期：2002-11-18

公开/公告号：CN1585822

公开/公告日：2005-02-23

主分类号：C12N15/63

申请/专利权人:拜奥根IDEC公司

发明/设计人:M·里夫;R·巴尼特

主申请人地址:美国加利福尼亚

专利代理机构:中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

代理人:刘晓东

国别省市代码:美国;US

权利要求：

1.用于在真核宿主细胞中表达功能抗体的多顺反子载体，该载体包括多顺反子转录系统，该多顺反子转录系统包括下面的在5’-3’方向上有效地连接的元件：(i)在真核细胞中有效的启动子；(ii)包含编码抗体轻链的第一DNA序列的第一顺反子，该第一DNA序列可选择地在它的5’末端包含在真核细胞中有效的信号肽编码序列，其中所述的第一DNA序列在它的3’末端不包括polyA序列，并且其中所述的第一DNA序列包含5’起始密码子和3’末端终止密码子；(iii)从选自心病毒、疱疹病毒和脊髓灰质炎病毒之一的成员获得的内部核糖体进入位点(IRES)；和(iv)至少一个第二顺反子，该第二顺反子包含下面的元件：(a)编码抗体重链的第二DNA序列，其中所述的第二DNA可选择地在它的5’末端包含在真核细胞中有效的信号肽编码序列，并且其中所述的第二DNA序列只在该DNA序列是多顺反子中最3’端编码序列时，在它的3’末端包含polyA序列，并且进一步分别在所述的第二DNA序列的5’和3’末端包含起始和终止密码子；其中在包含多顺反子载体的真核宿主细胞中，第一DNA序列以相对第二DNA序列10∶1-1∶1的比例被表达。