核酸扩增方法

摘要：

以高灵敏度和特异性扩增样品中的目标核酸的目标核酸扩增方法；以及这些方法中所用到的组合物和试剂盒。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN02820650.9

申请日期：2002-08-20

公开/公告号：CN1633505

公开/公告日：2005-06-29

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:宝生物工程株式会社

发明/设计人:榎龙嗣;佐川裕章;加藤郁之进

主申请人地址:日本大津市

专利代理机构:中国专利代理(香港)有限公司

代理人:马崇德

国别省市代码:日本;JP

权利要求：

1.一种扩增核酸的方法，该方法包括：(a)混合模板核酸、一种脱氧核糖核苷酸三磷酸、一种具有链置换活性的DNA聚合酶、至少一种嵌合寡核苷酸引物、至少一种上游阻断寡核苷酸以及一种RNaseH制备反应混合液，其中所述嵌合寡核苷酸引物与模板核酸的核苷酸序列实质互补，它含有核糖核苷酸，以及还含有选自脱氧核糖核苷酸和核苷酸类似物的至少一种，所述核糖核苷酸位于该引物的3’末端或3’-末端侧，以及其中所述上游阻断寡核苷酸与模板核酸上与所述嵌合寡核苷酸引物实质互补的区的3’侧的核苷酸序列实质互补，而且该上游阻断寡核苷酸3’末端的核苷酸是经过修饰的，从而使在DNA聚合酶作用下互补链延伸反应不发生；以及(b)将上述反应混合液保温足够的时间以生成反应产物。