修饰高等植物基因组的方法
本发明建立了基于同源性重组的基因组修饰技术,用于将基因组的部分序列改变为所期望的序列,而这种技术曾经被认为在高等植物中很难达到高效,且可重复性不高。根据本发明,以高等植物的内源基因组序列作为靶序列可以非常高效的和可重复性的产生同源重组体,而不改变它们的原始基因座。此外,本发明能生产出转化植物,其中特定基因被修饰而没有任何限制,而且也有利于对基因功能进行分析和对基因组动力学的变化相关联的基因表达机制进行分析。
发明专利
CN02820275.9
2002-08-23
CN1610747
2005-04-27
C12N15/82
日本烟草产业株式会社%欣根塔有限公司
饭田滋;寺田理枝;稻垣善茂
日本东京都
北京市柳沈律师事务所
巫肖南%封新琴
日本;JP
1.一种用于通过同源重组来修饰高等植物基因组的基因构建体,其在T-DNA的BR(右边界序列)和BL(左边界序列)之间以下述的顺序自BR包含如下元件:(1)可表达状态的第一负选择标记基因;(2)第一克隆位点,用于整合欲与宿主基因组中靶基因发生同源重组的基因的5`区;(3)可表达状态的正选择标记基因;(4)第二克隆位点,用于整合欲与宿主基因组中靶基因发生同源重组的基因的3`区;和(5)可表达状态的第二负选择标记基因,它可以与第一负选择标记相同。