一个烟草强核基质结合序列及其分离鉴定方法与应用
一个烟草强核基质结合序列(MAR)及其分离鉴定方法和应用，属细胞生物学和真核基因表达调控领域。具体涉及从烟草基因组中分离出一段新的强MAR序列，具有典型的MAR序列特征，在体外与核基质有较强的特异结合能力。将该MAR序列应用于植物基因表达载体的构建，即将其顺向构建到表达载体pBI121 gus基因表达盒两侧(见附图1)，以不加MAR序列的表达载体pBI121作为对照，转化烟草，GUS酶活检测证明该MAR序列可使外源基因gus基因的平均表达水平比对照提高5倍。表明分离得到的烟草新MAR序列是一个很强的增强子元件，可以极大的提高外源基因在转基因植物中稳定、高效表达水平，能够作为一个重要增强元件用于各种类型的植物高效表达载体的构建，应用于植物基因工程的研究和产业化。
发明专利
CN02135530.4
2002-09-13
CN1401790
2003-03-12
C12Q1/68
山东农业大学
郑成超;张可伟;王健美;杨国栋
271018山东省泰安市岱宗大街61号
济南三达专利事务所
孙君
山东;37
权利要求书1.一个烟草核基质结合序列，其特征在于，具有SEQ ID NO 1所示的序列：SEQ ID NO 1的信息(a)序列特征：*长度：1001碱基对*类型：核酸*链型：双链*拓扑结构：线性*A/T百分含量62.8％*A box(AATAAAYAAA)数目：0个*T box(TTWTWTTWTT)数目：1个*解旋序列(AATATATTT或AATATT)目：2个*拓扑异构酶II结合位点(GTNWAYATTNATNNR)数目：1个(b)分子类型：DNA(c)假设：否(d)反义：否(e)最初来源：烟草NC89(Nicotiana tabacum L.cv NC89)(f)序列描述：SEQ ID NO.1TCGATTAAAAATCCCAATTATTGCGAGTGAAAGCTGCTCAATATTGCTTAATAGAAGAAA 60ATTTGTATCGAAATGTTCATGGGACCCTTAGCACGGTGCCTTGGTCTATCACAAACTGAA 120TATGTGATGCAAGAAGTACATAAAGAACATTGTTGCAATCACGTTGGAGGAAGGTCATTT 180TAAAGACGCTAAAAGGGGCGGTATTATTTGCAAAAAATAGAAGACAAAGCGAAAATTTTT 240ATTAGAAGGTGTGATAAATGTCAACGGGGTGCAAACAATATGCATCAACCAGCAGTGTTT 300CTTCATTCAATCATAGCACCGTGGCCGTTTATGAAGTGGGTTATGTATTGTAGGTCCTCT 360ACCTAAAGCACCAGGAAAGGAACGACTTTTATTAATCTTAACTGATTATTTTTCTATGTG 420GGTAGAAGCATGTGCCTTTAAATAGATCGAGAGAAAGAGGTTGTTGATATTATTTGGAGG 480AACATAATATGTCGATTTTGTGTCCCAAGAAAAATAGTACGCGATAATGGGCCACAATTC 540GTAGGTTCAAAAGTTACCGATTTTCTCAAAATCTGGGAAATTAAACAAATTATTTCGGCG 600CACTGCCATCCCATAGCTAATGGGAAACCATAATCGACAAATACAATTATTGTCAACAAT 660ATAAAGAAACGGTTAGAATCATCAAAAGGCAGGTTCCCTGAAGTACTACTTGGGCTAGTA 720TGGGATTACAGGACAACGACGAAGATAAGCACAAGAGAAACACCATTCTCACTTATTTAT 780GGTACTGAGGCCTTAATTTCGGTGGAAATAGGAGAGCCAAGAACAAGATACGTACATACA 840AATGAAGTAACAAATGAGAAAGAACTTTTAACAAATTTAGATTTGACAAAGGAGATAAGG 900GAAGCAACTTTGATACAGATGGCGGCACAAAAGTAGAGGATTGAGCAATATTACAACAGA 960AAGGCGAACCTTCGATATTTCAAGATTGGGAACTTCTTCCT 1001