双链核酸微阵列芯片制备方法

摘要：

双链核酸微阵列芯片制备方法是一种由单链寡核苷酸制备双链核酸微阵列芯片的方法。该方法制备双链核酸微阵列时先将固相化学合成的3′端含有两段反向互补序列的单链寡核苷酸片段转移到固相支持物表面，经5′端连接在固相支持物表面形成单链寡核苷酸微阵列，再将两反向互补序列退火形成发夹结构提供引物，依靠核酸聚合酶聚合反应填平单链寡核苷酸片段的剩余单链部分，从而在固相支持物表面形成完整的双链核酸分子，成为双链核酸微阵列芯片。本发明制备的双链核酸微阵列芯片可用于高通量检测双链核酸如dsDNA与蛋白质等生物分子的相互作用，在基础分子生物学研究和核酸结合药物的筛选中有广泛的应用价值。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN02112780.8

申请日期：2002-03-20

公开/公告号：CN1379114

公开/公告日：2002-11-13

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:东南大学

发明/设计人:王进科;陆祖宏

主申请人地址:210096江苏省南京市四牌楼二号

专利代理机构:南京经纬专利代理有限责任公司

代理人:沈廉

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

权利要求书1、一种双链核酸微阵列芯片制备方法，其特征在于该制备方法包括如下步骤：(a)将化学合成的单链寡核苷酸片段通过其5′端连接到固相支持物表面，形成单链寡核苷酸微阵列；固定的单链寡核苷酸片段在其自由3′端含有两段反向碱基互补序列；(b)固定的单链寡核苷酸片段其自由3′端两段反向碱基互补序列退火，在单链寡核苷酸片段3′端形成一发夹结构；(c)核酸聚合酶以发夹结构为引物进行核苷酸聚合反应，填平固定的单链寡核苷酸片段的剩余单链部分，在支持物表面合成完整双链核酸分子，使单链寡核苷酸微阵列成为双链核酸微阵列。