双倍和三倍读出测定系统

摘要：

本发明提供测定方法用于鉴定影响目的蛋白转录活性或影响目的蛋白稳定性的化合物。三倍读出测定系统可用来鉴定影响目的蛋白转录活性的化合物，使用三株细胞系以对非特异效果如插入基因两侧的序列和细胞毒性进行控制。双倍读出测定系统评估蛋白稳定性并利用报道蛋白和目的蛋白的融合蛋白。这些测定系统在鉴定影响转录因子和肿瘤抑制物的化合物方面是特别有用的。在特别的实施方案中，肿瘤抑制物p53是在研的靶蛋白。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN01821527.0

申请日期：2001-10-25

公开/公告号：CN1639355

公开/公告日：2005-07-13

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:哈佛学院校长同事会

发明/设计人:金泰国

主申请人地址:美国马萨诸塞州

专利代理机构:中原信达知识产权代理有限责任公司

代理人:丁业平%王维玉

国别省市代码:美国;US

权利要求：

1.一种鉴定影响受p53调节的基因转录的化合物的方法，所述方法包含下列步骤：提供第一株含有构建体的细胞系，该构建体包含与第一报道基因可操作连接的p53结合元件；提供第二株含有构建体的细胞系，该构建体包含与第二报道基因可操作连接的p53结合元件；提供第三株含有构建体的细胞系，该构建体包含与第三报道基因可操作连接的启动子；将测试化合物与三株细胞系中的各株的细胞接触；以及确定测试化合物对三种报道基因表达的影响。