一种高效表达生产肽抗生素的方法

摘要：

本发明公开了一种利用DNA重组技术高效表达生产肽抗生素(Peptideantibiotics)的方法。还提供了一个可高效融合表达肽抗生素的承载蛋白(Carrierprotein)序列，通过构建承载蛋白与肽抗生素的融合蛋白表达载体，转化微生物宿主细胞，培养转化细胞克隆并进行融合蛋白表达，表达的融合蛋白可占微生物宿主细胞总蛋白的40～45％。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN01131855.4

申请日期：2001-12-21

公开/公告号：CN1379112

公开/公告日：2002-11-13

主分类号：C12P21/02

申请/专利权人:中国人民解放军第三军医大学

发明/设计人:饶贤才;胡福泉

主申请人地址:400038重庆市沙坪坝区高滩岩正街30号

国别省市代码:重庆;85

权利要求：

权利要求书1.一种高效表达生产肽抗生素的方法，其具体步骤为：(a)设计并克隆一个承载蛋白(carrier protein)编码序列；(b)将(a)所述的承载蛋白序列插入一表达载体，使该基因处于表达载体启动子的控制之下；(c)将(b)所述的构建了承载蛋白的表达载体转化微生物宿主细胞，筛选并鉴定阳性重组子；(d)克隆准备生产的肽抗生素(peptide antibiotics)编码基因；(e)将(d)所述的肽抗生素编码基因插入(c)所述的阳性重组子中，使肽抗生素位于承载蛋白的羧基端，并与承载蛋白编码序列融合成为一个融合基因；(f)将(e)所述的构建了融合基因的表达载体转化微生物宿主细胞，筛选并鉴定阳性细胞克隆；(g)培养(f)所述的阳性微生物细胞克隆并进行融合蛋白表达；(h)收集表达产物，纯化肽抗生素。