一种将外源基因转入灵芝的方法

摘要：

本发明公开了一种将外源基因转入灵芝的方法，用溶壁酶将灵芝菌丝体酶解成原生质体，所制备的原生质体经精制、纯化后，利用PTC转化缓冲液，以纯化的灵芝原生质体作为受体细胞，将含有外源基因的真菌表达载体转入灵芝原生质体中，再将转化后的灵芝原生质体进行再生培养和选择性培养，从而获得灵芝转化株。本方法的转化效率可达60－100个转化子/μgDNA.10⁷转化子，能高效地将外源基因转入并整合到灵芝基因组DNA中，并使外源基因得到高效表达和稳定的遗传，从而建立了灵芝的高效转化系统；这将为利用基因工程技术改良灵芝的药用品质奠定基础，使得灵芝这一宝贵的中药资源得到更充分的利用和开发。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN01129744.1

申请日期：2001-10-11

公开/公告号：CN1358840

公开/公告日：2002-07-17

主分类号：C12N1/14

申请/专利权人:李刚%李宝健

发明/设计人:李刚;李宝健

主申请人地址:510275广东省广州市海珠区新港西路135号中山大学生物工程研究中心

专利代理机构:广州知友专利代理有限公司

代理人:宣国华

国别省市代码:广东;44

权利要求：

权利要求书1、一种利用PTC转化缓冲液将外源基因转入灵芝的方法，其特征是用溶壁酶将灵芝菌丝体酶解成原生质体，所制备的原生质体经精制、纯化后，利用PTC转化缓冲液，以纯化的灵芝原生质体作为受体细胞，将含有外源基因的真菌表达载体转入灵芝原生质体中，再将转化后的灵芝原生质体进行再生培养和选择性培养，从而获得灵芝转化株。